Transcription factor ZBP-89 drives a feedforward loop of β-catenin ...

Post on 11-Jan-2017

215 views 1 download

Transcript of Transcription factor ZBP-89 drives a feedforward loop of β-catenin ...

� �

������������ ��������������������� ��� ������������ ����������������������������������������

��

����������������� !��"��#$�"$���������!��%�&���'����(�%$�(!��)�����*+����!��)&��*������!��)�+$��,���������!��-��+����-�.����!��)&������+���+�$��!��-������"�/$��"����� !��)�+����,��0��1!�23���4�-��"+�+!�5����(��6�7� �!��!2,$�����8��-���+�����9���&����� �:�������-��������6�����������1�;�2-����$��������:��1�������+������1�!�<���������� �-��+�1��!�)���)�=��!�-:;�5"�&&�������<��������!�2���9���&���� ����������!��$����!�.$�1�����

������=$����/$������*����>�,$�����8��-���+����?����������+����8�)���)�=��!�-:�@��?��22??�A5@��5B�B5BC�&���+��#D$&��+���$�������������>��������:��$������ ��*������6���������������0���E����>�����������;���&���;���������;�)�*;�*+:����+���$+����+���������� ����� ������������� ��� �������>�,-��%?��90CCA52�3"��%?��*)�@��2��� *$�����)��������>�������������!��+�9������������������������������������������-������"�/$���"�����!��+�9�������"���<�������������������������������������������������<���������� �-��������9���� ������1��F)���&��G��+������1�H��������9��� �)��&���"�������2???�E�<���������)��������������������������������������@�C0�)"I)-;�����J��+�)���-$����!�:K�@A5?B��������������������������������������������"����$�!�-K��CC�?��B?�@��=�������D=�$���$�����������������������������

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� �

���� ���F2@�I2C?H��:�������������������F*%*H!�)�*�&����������$������ �$���1$����������1���+�

������������������������&��+����&��+��������������&�����1��������� �

��������1�������������F*�KK��H������������$�����������������+��

�$���$���.������!��=�$��?�������� �����������$&�����������+�=������������

*�KK���&%K)��.��������+������*%*�+����������������������� ��KJ�@�!�

+��1���������1� �������������� �����������!�������������+����$���������

�$������������$����������+�����+�����������������������������������+��

��������1���� �*%*��*������������������� �� �@�������&�$���&������ �)��

&�����������������������&��������+���������������/$����� �������

��&������$�������$������ �*��=��1���������������*+:�������-")������ ����

���������=�����1��������+������&�����&����� �*�KK����%����������!���%K)�

&����������$������ �*�KK������������������������������������������*+:��

����� �����*J�9K)�=�����1���������+���KJ�@����&����+��$1+��+��+�E��

��1�����1���1$������KJ�@��1���������������"$��������� ���+����KJ�@�����

*�KK������$����������� ��&��������EK���������!�=$����EK��

�����������������������+��� ���!�+����������������������$�����L�������������

��������=��)�*�&$����������$�������=���������&������� ��� �������

���$������ �*�KK���&%K)��

� �

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� �

�������������������������

-$���������+�������&��$���������������1����FAPCH����$������=�$�

�?M�� �������������������F*%*�H�F�!�2H���-���� �+��&$������������

������������+�+�����������$��� �+��CTNNB1����$��Fβ−������H!��+��+�

���$&$��������+��������&!�����+����������������+���$���$�����������

��+�9K)�=�����1�����������+��������� ����� �&����F8�JI�*JH��������1�

���� ���������1��1�����F2!�5H��)�+�$1+���&��*%*����+�=��&$���������

��������&�E����1��1����!���1�!�AXIN2!�CCND1!�MYC!�E����������

���� �������+���=�������=$�����&���������������������������������+��

���������β−���������������=�������)�������$�!�+�����������$�+����������

+��� ��$���������1���1��+�����+������������$������β−�������������F@H���

E+����������$�����+�����+��������������&%K)�����������=�������$�

+�=����(����!��������������������� ����$�����������FC!�BH!� ����������+�������

��$�������1$������� �β−�������1���������������%������!���+���=�����+����

+��+������+��&�����$�������β−������������������FAH���:��*%*�������

&�������!�β−����������������������������������+��$1+��*J�@�F�H!�

�$11����1�+�����������1�CTNNB1 &%K)������=$�����*%*���1���������

9��+���������������4���������+�� ��������&����+����������� ���������

��1$���������&������+���+���������+$&���CTNNB1���&����!�����

���� ������������ �������������9K)�=�����1�������+���+�� ����2???�=�� �+�����

��&����F�H�����������!�+��+$&���CTNNB1���&�������&����6*����+!�

�����������)�)�=�������5�$�����6*����+�"���������+���+�� �����C?�=�� �

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� �

+�����������������������F�?H��.������!�+�� $������� �+��������&���6*����+�

���&����������� $������������������

�����J��1���������1�����������49��F���������������������=��+��

+$&���ZNF148����&�$���Zfp148 locusH������$=�/$��$�������������Krüppel����

(���� ��1�������������� �����+��=�����6*����+�9K)����&���� ��/$��������

���������+�"��F����5H��������������/$����� ���&$�����������������+��������

�+����+�����1�����+����+�1�������&�������&$����������$����&��+����&��

+�����4�������������+�+��E���������+����F�@!��CH��J$�+��&���!����

�$���+��&�����������1����������������������� �Zfp148���������������+������

������FZfp148�IECH�����&�����$����=�����&$��������&�1�� ��&��� ����$��

�1�����������$�������$�������$���������� ������������������&����=����

������F�C!��BH��������������1�(�����+�β−������������$���&$�������� �����

1������������1����+���+�������������������&����=�����������������

�� �������F�CH��.����1����=���+���+�������������β−������� $����������

�����������+�����&��������!����������������+�+������������1$�����

CTNNB1 1�������������������������������+�&��������=$�����������&���1�

������������� ��&������

:�����$���� �A@2�*%*�!�ZNF148�1���������������������������+��

��������� ��&����&�������1����*%*�=$�+����������������������1���� �

���������1��������F"�1���:::�����:NH�F�AH���+����$������������������+���

������������������1�+��ZNF148�����������1$��������������������������+��

��1���������1��:::�F��H��E�������$�����+�����+��������� ��&����������

��������&������+�+��$&����$�������C5�F��H�������������������������

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� �

+�����$�������C5� $������������1��������������� �����Zfp148��������

����������C5��������F2?!�2�H��-�������!��+���������+�����+����+���������

������������������&�������+�1���!����������������+�������$�����������&��

F22�2@H��"����������������������&%K)������������������������$��������������

������������$���1���&��+�F2CH�����*%*F�AH!����+��+���(���+��+��

����������� �������4�����������������������������$&���1��������������&�����

�+�+���������������1�(�����+�E����1�����1�+��$1+�����=���������1$����

CTNNB1 1�����������������

� �

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� �

��� �� ��� �!������ "�# ������������ $�����+����+$&������$���������F*'*�C?�!�

*'*�C?2!�*'*�C?5H���������1���������������&��������$����������&&�

��������� �+$&���������F@����&������������$�!���������&�����������������

����������5H������$��+����� ��&�����&����F%��+&���!�*);�

�������&������&H���������$���+���1�!�1�����!��+���1�!�$&���1���������

��1�����

� % � �& �������'�' �(��'����"$��������$����������1�������� ��&�

) �&�����&�������������������������+��6��������������'&��=$��F6�'!�

+>II������=����&���+�1��I1��IH���+�������+���&�������O�����P!�O������P!�

O6�8�BP!�O6�8CA?P!�O6�8CA�P!�O�$������P������������������&=��������'����+��

6�'� �������+��$����������������$��������������� ������>�%J"�����Q��5A5>�

�6"��2�@C��QC��;�6"��@555��Q22B�;�6"��AC5���Q252�;�6"�5�C�C��Q5A�;�

6"�55��@��Q�?�;�6"�5A��2��Q�5?�;�6"�5�C�2��QC���;�6"�@�2C���Q��C���

������������� �+���@??���&�������+�����������������������+���$�������

�������������+��� ��������$���� ��&�+�������������+��� ��������� �������+�

�$����������������$�����6������������������+��O������� �����$������P�����

��������1�������&$�����$���������������=�������������(��+����1������

���$��� �+��ZNF148���=���BERF-1 ���BFCOL!�+��������������������

��&��������������������1��$����������1���+�1+�����$�������������� �1����

��������������+��������$������1�������0�����-���������� �O������� ����

�$������P������� �������$�� ����$�!������&$�����*�����1����������������� ���

���+����������=������+������������$���/$�������� �1������������������

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

+��=���+���+��������$�����+���������1�+��0�����-��������F2BH���+��

+�(������������+��CM���� ����������������������1����4�P ���$�����������$�����

���������=��������$����F2AH���������������������������������������������������������������������������������������������

� ���# �#�������6���������� �Zfp148FL/FL�&���������*CA�8IB�1������

=��41��$������������$����������=���F�CH��ApcFL/+,�Zfp148FL/+�����Zfp148FL/FL�

&���������=������+��VillinCre�FN*H��������1�������&����+�������

+����(�1�$�� ���+��Apc ������ �������������������������+�+��Zfp148FL/+�����

Zfp148FL/FL�1��������)���&�+�������������$����������������=��+��

<���������� �-��+�1���)��&���*��������<���*�&&���!��+��+�&�����������

)&�������)����������� �)�����&�������)������������ �8�=�������)��&���

*���� ��������

) �#���� ���(��*����.�<��������!� ��(������4�������1�������!�

�+��4��� ���&������&����+���5�&��+��� ������&��������$����=������5�

����2?�����1���� ����������.�02�5�����"E@�?�����������������������

$��+����� ��&�)�**����2?�C!�����+��989�����������2?�B���+��0-�2������������

�����$��+����� ��&�+��K*:�%�����������2?�5���+��989�������%0'������������

�����4��������������=�������J������F<���������� �-��+�1��H��)��������������

989�������%0'�������$�$�������9-�-�F6:�*'!�8� �����+����1���H�

�$��&�������+��?M� ����=���������$&�FJ�"H��������=������F�??�<I&8�

�����������$���??�μ1I&8�����&����H��%0'�����989���������������$�$�������

%�-:��B@?���+��?M�J�"!�1�$�&�����������=��������

�� �������� ��+��������E������&$���F-$H�CTNNB1�8$����������

FAC��1��������H���+�2��1�I������ �%����������������������� �������+�

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

8�� ���&����2???�F8� �����+����1���H�����"E@�?��������$�$��������2������

�����2@+��J��� ����$�� �������������&���(�����%�����������+������&�������

�� ��&�������$������+�����&������%K)����� ���������������������$�$���1�

8�� ���&����%K)��-)R�������=����� ����&���$&����%K)����1��� ���ZNF148�

�������������&��$���� �@�1���&�����/$������F��6�K'-��"-)%����!�

9+��&����� -�?�2BC��?�H���������CTNNB1���%K)������� ��&�J��+���"����� ���

F )-�BA?�H��

(!��# ����##���������� �����(!�)�,�"E@�?��������������������+�

�M� ��&����+��������+���/$���+�����+�1������� ���C�&��������&��&���$����

*�����������FC??S�H������������������+����9K)�������&������2??����???�=�

��1&����F@��������� �5?�������������H�$���1����5?E�"������N�=�������

FN*R�5?��!�K����!�*�H��)�����/$��FCMH�������&����� ��&�+���������� ���

������$�9K)�����+����&�������F@ACS�H�����$�������&&$����������

��������4�����������+���+�������������=�������:16�F���=����������H��

:&&$�����&�������������$����$���1��������)I6��1������=�������) ���

����������+���+��=�$�����������������$��� ��&�+��=������������$����>�C�

���������(��������F���-�1���*+:��)I6�0�!� �A��??�B!�-�������!�-)H��) ���

���������0�����%K)����)���1������!�����������+��&���� ��1&���������

�����(���=���*%�$���1�K���Taq�9K)�����&�����!�F-�������H�����5������ �

��&���� ���4��1�+��CTNNB1, ZNF148 or ChrA���&������1�����F"$��&�����

���H��

����� ��&�*+:������������ ��������=�����1���+��ZNF148���&���!�

+�������������������������������� ����in silico�$���1������������1�&�������

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� �

+������� ��'82)�=�����1 ��+���+��<*"*�6���&��=�������

F+>II1���&��$������$H��*+:��/�*%����$������������������������ ���$�

9K)�� �����/$�������� ��&���������&���� ���+$&����+��&�1������)�F*+1)H�

�����$�������+���������������&�������������*%����$��������������������

���M��1������1��!���/$����������+���/$��� ����=��/�*%� �����������

�����&�����

-� �� �'���� &��#��)(���*$�$���������������+��������������(���

F:�����1��H� ���%K)��������������9K�������&����T$���������*%����������

�������������$�������������9K)���&����$���1�+���:'�%)9�*�???�+��&���

������!������(�����+�*JR�-���1��N2��� ������������&���(�����Hprt��

�����&����������� ��&����������+�����&���������������-�$����*%���&���

����� ���Zfp148�����>��

������>�CU�66*�)�6��*���*)���*�)�)�6)6�6;���������>�CU�*�*�)�)�**)�*)���*)��*)�*)6�*���

Hprt���&������������>��

������>�CU�)6��***�)6*�6�*�6�6�)���)6*;��� �������>��CU�)�)�6**�***�*���6)6�*)*�)*)�6���

(���$����# ������� $,�989�������%0'�����������������������B�

�������������1���+�&���$&�F�?M�J�"H����???������I������J���0-�2�8@�����

"E@�?������!��??������I���������������������B��������������1���+�&�����

��������1��?M�J�"��"������+�$���� �������1!�+����������������� �������+�

2C��-���6���&��"-)%�������%K)�� ���ZNF148�F-�?�2BC��?�!�9+��&����!�

*+���1�!�:8H!�CTNNB1�F-�??5@�2�??!�9+��&����H����������1�������������

F*��H�F9�??�2?B��5!�9+��&����H��-����������������+���������+�����������+�

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

��%K)�����������1������������$������������� ��&��������4�5�������1�

� ������������2?M���+����������������������+���"!� ���������?M� ��&����� ���5?�

&��$��!�����+���������� �����$���1���+������$����� �?��M����������������+��

�$&=���� ���������� ��&��� ������+����&���������������������������1��� �

+��������1�������������%K)��

������ $���+��-��������������� ��&�����������1���&��$ ��$���U��

����$����������� ��!�%0'!�989��!�0-��2�����"E@�?�������F�???��������������H!�

��������� �������+�+��1�������� �������������1������%K)����1���F2C��-H��

J�$�������� ������� �����!�?�C�&1I&8�� �-�����=����1����$����������������

���+�������������$=���� ���@�+�$�����5AV*��J��&�(�����������1�������������

����������=�����$=���1���+�+�����$=���(��������1���������1+!�����+��

�=���=���������&���$��������������������)CA?������� ��������������1+�� �

)BB?��*�������=�������������&�����$���1�+���/$�����)CA?�W�)BB?�F������

���� �������+�CTNNB1����ZNF148���%K)HXIY)CA?�W�)BB?�F���������� �������+�

���������%K)H���??�����+������������������������������������B������F�???�������

�������H������������� �$��+�$���� �������1!�+����������������� �������+�

2C�-�� ���������1���!�ZNF148����CTNNB1���%K)�$���1�����,������ ������

���1���F":6K)6��H���������1���+��&��$ ��$���U������$��������+��"553�

�9K)������������������������� �����2@+�� ������� ������� �+����%K)�

�1����$���1�+������,�����1�������������� ���=�+����� ������!�?�C�&1I&��� �

-�����=����1����$�������������!����$=���� ���@+���5AV*�����+���&���$����

���������=����=�����

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

������ �.�������/���� ������+�����������&$���������&����������C�

&&�������������� ��������=��1��������������������2&-��9�)I��"���@V*� ���

5?&�����) ��� ��������+��$1+����??S&�������&��+!�+���$������������

����� $1�����2??Zg� ���C&��!�+��1���������������$����������C?S��� �-���1���

�$��&�������+�)��������9-�-IJ�2!�F:�����1��H���������1�C?M�E���$��

%�"�����������������&�����1�������� ��&���=�����������1�8�������F2�H���+�

���������� ������$��+����� ��&�:�����1��!�����!�K�11���F�??�1I&�H������6J�

FC?�1I&�H!�����+����$�$������5AV*����CM�*'2������������� ����$�$���1�+��

����-���1��!��$�����������������������=����������+��E�������$�$������+��

��������� �=$����1��������������$���+�������������$&������������������

� ���+�������������1��$��5���������������1�����

� ���� ��� $�����*�&��������&��1�&$�����+�����1���1��$������

�� ��&���$���1�0�$�4���E������������������=�����'�������)K'N)���+�

�$4��U����� ���&$�������&������������$��������&���������$&=���!�

���&���(����$�� ���������$��!�-�������������� ��&��1�����������������)K'N)�

����$�����������(��+���������I�+�������&����$�����

� �

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

������

����� ����ZNF148��0�������������� ���1�!���������'�' ����(�(�

)�+�$1+��������������������������������������������+������$�������

��������������������+�1����������������&���F�A!���!�22H!��+��*������

6���&��)����F�*6)H����=������+���+��+��ZNF148����$��+����������

����������&$��������������@M�� �*%*��F����� �C?@������� ��&�5����=����H�

F��=���"�H��������&������������������������������+������������ �����

+�����1�������1��!��&&$��+����+�&�������������������� ��&������5������ �

�����������������F*%*H����$���������������������������������������&���

+$&���������������������=������� ���β−�����������������������FJ�1��)!��H��

)�+�$1+�&���� �+���������������1���&������������&������I���&�&=����$��

FJ�1����*!��!�6!�:!�0H�����������&��������1��������2�BM�� �+����&���!�+��

��������� ��������������������������&���������������1�� ������������������

��+������������������������������&����������&���������FJ�1���*!�9H��

-�������!�+��&�&=����$������������&���������1������ ���=�+��������

��������������*%*����������������+������������

F+>II����������������1H��K$������β−���������������������=������������1����

������1��2�*%*������������������+�[B?M�� �+�����$�����������1��������

������FJ�1�����8H���+����������� �+����1���� ���=�+����������&��������������

������� �$�����������1�����&����������&���������FJ�1���-!�KH��:���������!����

���&������+�+�����������ZNF148�&%K)�����������������������+��$���������

-����������������� ������������������������������������ ��&�+��6����

'&��=$������������F6�'H�$=�������=���� ������������$���1������=������

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

FBFCOL and BERF1H�+������1��(����/$��������+��*���&��$������5U<�%�� �

ZNF148 FJ�1��"�H�����������ZNF148�&%K)���������������������*%*�������

������������+�������������� �����$���������&���������������+������������

� �����������FJ�1���'!�H���+��� ������������+��+��+�����+��������������

������������������=$����������&����1������������������ �������$����� �

����Apc�������!��+��+�1��������+�1+����������� ���������$����������

��=���(������

(������� �Zfp148����������������Apc+/�IEC&#��� �����$��+��# ����

� �������&����+�������������������������=$����������&��

��1�������!�������������������������������=�+�Zfp148��������������&�$���

&������ �β−�����������������������+��+�����Apc������������������������������

�������$���1�+��VillinCre�&�$��������FVC:Apc+/FL;Zfp148FL/FL!�+���� ����� ������

�����Apc+/�IEC; Zfp148�IECH��9�������� ��������=�+�Zfp148�����������������������

��������������1���+�F�CH!������������+������1�� ������� ����������0�BA�

������1����+������(����FJ�1��"2H���+��� ����+��Zfp148�IEC�&���������������

���+��&$���Apc�1������=��41��$���FApc+/�IECH!�����=���(��+������$�����������

� �������!������$=��/$��������������+�����������&$�������+���������

�������� ��&������9�������� ��������=�+�Zfp148�����������1�� ����������$����

�����������������&%K)����$���������FJ�1��2)!�H��-����+����(�1�$�� ���+��

Apc �������FApc+/�IECH�1���������$&���$���&��������������������+���C�&��+��

� ���=��+�FJ�1��2*��H!������������+������������F2�H��-�������!�������1�����

���=�+�Zfp148�����������1�� ����������$����+���$&=���� ���������������FJ�1��

JH!�=$����+����(�������������� �+��Apc��������������FJ�1��2.!�:H���

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

:��$ �������$&=����� ������������������+�����������������+��� ���� �

������1�Zfp148�FJ�1��26H��:��+��������� �+��Apc��������������!��������

������������������+�1+���+�����+������Apc�����!�����+�������������1�� �����

� ������&%K)��������FJ�1��2)!������$��29!�H������������������� ��������

���������������������+�+�������� ��������=�+�Zfp148���������FJ�1��29H��$����

��=���(������ ����������������+���������� �����Apc��������F5?!�5�H���

K����+������������1�=�+�Zfp148�����������1�� �����������������=�+��������

����������&%K)�FJ�1��29!�H��*����������!�+�������$�������������������+�

����������������������$������ �+��ctnnb1���&����=����������������������

+��$1+�&%K)���=����������=$��1���+������$��������� �β−��������������

ZNF148 ������ ��������2�&���������������1!�

��� $�+������+�� $������������������� �β−��������������������

������!�������� ��&��1��������������� ��&���� ���4���4��1������ZNF148�

����������=����%K)����β−���������������*%*������������F989��!�"E@�?H!�

�+��+����$�����$������)�*�������F52H����β−������������������*%*������

������F%0'!�0-�2H!��+��+����$�����������)�*�F55H�FJ�1��5)!�H��%��$����

���������������������������������� ��&�����FJ�1��5)!�H�������������=�����FJ�1��

5*H����+��β−��������������������������=��C?M�=$�+������� ������+��

β−������������������������������%��$���1����������������������������

β−����������������������;��+������%K)�&�������4���4������ �CTNNB1������

���$���������������������FJ�1��59H���

%��$���1�CTNNB1 �������������������������� ��&�����=��[�?M����

+������������������!�=$����+��������������������������������FJ�1��5)�9H���

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

J$�+��&���!����$������������=��������+��"E@�?�������������������=�������

��������1������$������������"553�&$�����������������!�=$�+������� ���

���+�����=������ �+���������������������0-�2�����������FJ�1��"5H���+$�����

�����$����+���������&��$������� ������1���+������E��������������������

��/$�������������:���������!����������1���������������������������������

�����������������������������������������1���+����+��989�������������FJ�1��

5�!JH���+��� �������+��������� �E����1�����1!��������������������������

�$ ������ ���E�−�������������1���+���

Zfp148 ����������#��������������������

E����1�����1����+�1+�����+��=����� �+����������������+����+����&�

�������������F5@H��J��&����������$����������1������ �������������������

��/$����������� ��&�+����&���������+��F5CH��9�������� �Apc�����&������=��

��������E����1�����1���&�����+�������+���������������&��4�=��� ���+��

�=������� �����=$���F5CH��)�������$�����������F5BH!���� �$���+�����������

��&���������&���� ��&�=$����1������1�������������� ������� ��&�+��

���������������&������� ���&��$���� ���&������������&�� ���1�������FJ�1��

@)H�����������!�1�������������� ��&�Apc �IEC /+&������&�����+���������������

��+�+�1+�E�������������&����������� �+����&������+������FJ�1��@�H�����

�������������/$��� ����FJ�1��@*H������������������ ��&�+��Zfp148 �IEC /�IEC�

&�������������+�=����1�� ������� �����������+�����=������� ��&�=$����1�

�����������&�������+��*�����1���������������������FJ�1��@9!��H�����

������!�1������ ��&�Apc�IEC /+;Zfp148�IEC/+�&����������&����+�=������&��

=$����1���&�������+��Apc�IEC /+ ��������, �+��+�1���������&�������������

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

=��������FJ�1��@9!��H����+��� ����+���+������+������������������+������1��

=������Zfp148�������������E����1�����1����+����&���������+��� ��������� �

����Apc�������;��+����=$����1����$�������+���������� �����Zfp148����������

������������������������ ������������ �=�+�Zfp148 ����������������+��

�=������� �����Apc��������FApc�IEC /+H!���������1�����/$���&��� ���Zfp148�

������������ ��&�����������)���������������E����1�����1����+���=������

� ����������Zfp148�������������$ �����������$���=$����1��

34)&56������$����� ���!� CTNNB1����#����

� .��+���(��1�+�����������������=�������+��CTNNB1���&���!����

����� �������������$�����������������2?�=�in silico�$����&� ��&�+��

���������������������� �+��+$&���CTNNB1 1����FJ�1��C)H��*+:�����������

���������+��+��&�������&���ZNF148����&�������2?�=�F��+���+���2?�������

��1&��H����������+��+�1+���� �����9K)�=�����1�������&�������

��������1�9K)���1&�������@22����2B�������C5�����5���FJ�1��C)H���+��

$�����6*����+��������=�����1���������2?��������&����� $�+���=���-")�����

�������������������&�������)�������� �+��$�����&�������������"��������

+����������� �"�����=�����$����+� ���+����&������+������������������

��=��=�����1��+�������������=�������������!���������1�+������&������ �

+����&����&��������������������FJ�1��C�H��E��$����9K)�� �����

����������F9)�)H�$���1���=������������=���� $�+�����&�������+������

���=��������� ���������+��9K)����&�������2?�=�FJ�1��C*H��)����1�E�����1��

��&�����������&������������=�����1���+��=������������=��FJ�1��C�!������5H�

�+����������=�����1���������������+�+����������� �+��2�=�&$������1��FJ�1��

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� �

C�!������@H��K��!�����+�����+�� $������1+���������������������$������

CTNNB1��$�� ���������������������1�C���=�� �+����&����=$�����������$���

+������������=�+�"E@�?�����.�02�5�������� �+��2�=�����&$���������

�����$��������+���������9K)�=�����1���������2?�FJ�1��C9!�!6H���*��

���� ����1����������������&$������+�+������������&������������+��

���$�������/$�����+����������� �(���� ��1�������������+���+���&������&�����

��&����FJ�1��C9!J!.H����+��� �����������������=���������������+��CTNNB1�

��&���������$�����������������+���&��+����&���������������������+�+��

�=���������+����&������ �+��Zfp148����������������������������&%K)�����

�������������������+�����������1�����!��+��+��$=��/$�������������������

��&��������Apc�&$���&����F����J�1��2H��

"�����+��4���4������ �CTNNB1����������������������������

����������FJ�1��5*H!���������+������=�����+��E��β−���������1�����1�

���$����+��ZNF148����$���$=��/$��������������1�+������$������������ ��������

�������In silico����������� �+������&���ZNF148���&�������������$�����

�*JI8�J������=���������A������C�5�F6���&���H!��+��+�������� ��&���=��

*+:�����������$���1����=���������������FJ�1��B)�*H������������������� �

E����������$�����������������������"E@�?����������$����ZNF148�&%K)�

&������&�����������+����������� �E�5)������������&�����FJ�1��B9H���

J$�+��&���!������������������ �����������1+������$����ZNF148�&%K)�

���������!��$11����1���&����1����� ���� ���1$������FJ�1��B9H����+$�!�������

=�+����������������������������������$����1��������������� ����+��+��!�

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� �

+�����$����������������$11����� ��� ������������1��=������+��CTNNB1�����

ZNF148������FJ�1��AH��

7����������

-$���������+��APC�1�������$���������������$������������ �β−�������

+��$1+����������� ��+�����F2H���.������!�+����&���� ��$��+���1���������

=����������������������&��+����&�����$���1����β−���������������=���(�����

���������������������+���$���$��� ��������������� ��&���������)�*������!�

β−�������+��+��������!�$=�/$���������������+$���1���+��������&���-����

�������!�������+������4������1���+��CTNNB1 1�������������������

�����=$�������������������$������������ �+�����������1�������+��������� �

APC�&$������������������=���������������������+����1����� �*%*�

�������������F�H��3��+������������� ���������$���1����1��������������+����

���=�������&���������������*�&����������������� �+��CTNNB1 ��&����

�&��1�&�&&����������������������+�������6*����+���������������������

$�����"�I�������=�����1��������+���+������&�����&���F�?H���

�+�������������������� ����� �&������������� �2��+���1����\ZNF281�

����ZNF740�F1�����������1H���ZNF281���������������������!��+��+�

����1��(���+����&��6*����+�=�����1���������������������+����9K)�=�����1�

��&���������A�M����������������M���&�����F5AH��E��+��� ���������������+��

������������������&�1+���1$������&��� �+����&����1��1�������

*������������!�+�������� ����������������������&�������+���=�����$��������

��&����������+�����������1$����1������������*%*����������1��������

F5�!�5�H��"��� ������!�+������������� �����"K):8!��+��+���&������+��������

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

&�����+�&������������F�-�H������������$����ZNF281�1���������������

-�������!�/$��������*+:��������������������+������������$����+��

��&����� �+��E����1��1����LGR5!��+��+�$��&����������������������

�����������+����/$�������� ���&�����������F5�H���������=�����+������&���

CTNNB1 ��&�����������$����CTNNB1�&%K)��������1�������&������!�

��&�������1�+����������� �&����&�&=�����������=�����������1$�����

CTNNB1�1��������������F@?H���+$�!�������!���������� �&����&�&=��!�����=���

��������������1$���������������������*%*�����������!�������������=������+��

CTNNB1���&����������� �����������!��$11����1�+���������&�1+������

��1$����CTNNB1�1����������������

8�4��������!�����+���+����+����������������������=�����+��CTNNB1�

��&������������=�����1������=$���������������������������������������1�

�������=�+�Zfp148 �������������$ �����������$������������&%K)�����������

���������!����$���1���� �����������-�������!��������������������������

Apc�&$�����1����������������&������+������F�+�������+��H!��+���

Zfp148�����������!��$11����1�+��������������������������+���&������)�

������������ �Zfp148��� ������������� �$������$�������� ��&�����������

Apcmin�&������ ���������������=$��������������+��1�������������F2�H!�

��+����$�������$����Zfp148����+���&&$�����&��&����+��������������

�����+�1+������������F�2H��

� )�������?�������� �*%*����+�=��APC�&$����������������������

���������������� ��������������������1�+��/$�����������+���ZNF148�1����

��������������������$���������������� ���������β−��������������F5�H���:������

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

��� �$���+��4���4��1������CTNNB1�&%K)������$ �����������&��������

���$�����������������������������+$�!���������$���+��β−�������������

���$&$��������+���=������� ��� $��������APC �����������������������1��&�� �

��������� �������+��$1+������1��1����!�����$���1����$������ �ZNF148 1����

�����������"$=��/$����!��$��������������� �CTNNB1���������������=��

&���������+��$1+�+��=�����1�� ����������������+��CTNNB1���&����

$�+����������1�+������� �β−���������������+���=������� �ZNF148

&$�������������������&%K)�����������APC+/����������$&�����$11���+��

$���1$�����E����1�����1���������+���������������������1����������������:��

+������!�+��������������������1$���������������O ��� ������P�&��+����&���

�$�����$���1$�����β−���������1�����1����+����&���������+��FJ�1��AH���

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

��+��������

��� "�+���4��!�,�!�������+����!�,���+������������E����1������1��+�����������)�*�����������������������������&����6$�2??A��CB>@�A�@2C��

2�� ����4��!����E����1�����1�������������6�����9���2???���@>��5A���C���

5�� .��=�!�)�!�,$�������!�N�!�0��=�!�"�!��+��&�!�"���!���$&!�.�!�6�4�!���!�����0����1�!�J����*�&��+����������������� �=������������1��1�������������������������&���������������+�����1$�����E�I=������������1�����1���-*�6���&����2?�@���C>A@��

@�� -���!�%���!������&��!���!���$���!�-�!����������&��!�K���+����&��������������� �E����1�����1�+��$1+�=�����������"�������2??2��2�B>�B@@��B@B��

C�� �����+����!�-�)�!���$���&!�%�!�,� ���!�%�!����=�!�:�!�����)�����!�-�%���+������������� ������+���������������������������������������������&���.$&���+���2??���52>�2�B��22@��

B�� -���!���!�6����!�-�!�"�����!�)�!�.���4�!�-�8�!�6���+��!�)�!�:����!�-�!����&��!�E�J�!�-����!�-���!�%���4��!���'�!��$+�!�.�,�!����������1��1������ �=����������������� ����I��&+������+������ �������1�����1����+$&��������������������&���������K���)����"���<�"�)��������B>�B?5��B?���

A�� 6$�1��!�*�,�!�0�&!�9�E�!��+$!�R�!��+��!�8�!�����*+��1!�"�3���$&����$�������������� ���1������+������+��&�����������=���=������������������� �=����������1��������������������������1��2?�?���C�>CC2��CC5B��

��� ���������!�'�%�!�9�+�&���!�"�!�.����!�%�!�-��+���6����1��!�"�!�E��(!�,�!�"�+��&��+��!���!����������!�0�������������������������� �+��=����������1������+����������� ����� �����������������&���������,���+���2??���2��>5A?�5A���

��� 8�!�T�!�9��+����!�E�-�!��+��1!�R�!�)��J�1��+!�-�!�����9��+����!�%�.��*�����1�� �+�����=����������1����F*��=�H���&����������� $�������������������&�������+�+��*��=�����*�KK�����&������6���&����2??@���5>25��2@2��

�?�� K����!�J�!�����!�6�!�-���&���!�J�!���������%��!�J��6���&�����1���(������ �+��+$&���=����������1����F*�KK��H��6���&�������B��52>@�5�@2@��

���� -���+��!�,�8�!�:���!�6�%�!�������!���%�!�0��+��!�,�%�!�-�������!���%�!�E��1!���!�J���� !�%�,�!�-��+��!�,���!������������9$=�!�%��������!���0�$�����4��(���� ��1��������!���+�=��������&���1���+� ��������$������ �+��1��������&�����-���*������������B���B>BB@@�BBC5��

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

�2�� 8��!�6�8�!�:�+!�.�!�8��!�9�,�!�-�(�!�6�,�!�-���+��!�,�8�!�����-�����!�9�%�������������� ��������������1$�����+���������� �+������+���������=����������&�����,������*+�&�������2A5>���CC����B@��

�5�� ���!�8�!�����-���+��!�,�8�������������� �����������������������+�+��������������� ������5??��$���1�=$��������������� �2��� ����������������+$&����������,������*+�&�2???��2AC>5?A2C�5?A55��

�@�� 8��!�9�,�!�8�=$!���-�!�)��&�!�%�9�!�����-���+��!�,�8��)����� ��&�� ������������������+������������������K$������)�����%���2??B��5@>�5@2��5C?��

�C�� ������!�����!�6���=��1��!�.�!�%�&���!�%�9�!�8��!�9�,�!�N����&�����!�K�)�!�"�/$��"�����!�-�!����������!�-�!��������!�)�!�.����!�-�-�!�3��1!�)�*�!��������������%�1$���������������� �����+���.�����������:�����-$������9� �����)1�����"��&���������+�&$��$&����-�����6�����������1��2?�5���@@>�@BB��@AA��

�B�� 0�&&����!���!�����0�$��(!�,�9��6�����$�������&$�������� ������*$���'���6�����������2?�@��5?>C�5�C����

�A�� 6��!�R�.�!�8�$!�T���!�*+��1!�E�!�R$!�R�9�!�9$!�3�!�.��!�3�!�8�$!�3�!�3$!���T�!��$�!���6�!�R��1!�,�,�!������������������ ��KJ�@������� �������������1���1���� ���������������������������1���������$�>������1��*+�������$���=�����������$��&�����������*������2?�5�����>22�2�2222��

���� �������!���!�-��$&=���!�%�!�*$=���!���!�.������!���!������!�%�!�8�=��1�!�)�!�6�=��$!�<�!�"���!�,�,�!�����6������J��������!�,��)�1������1��$���� ���1�������$�������� ��+�����4�� ����$�������������1�����������9$4��]�����������������������'�����%��2??A���A>�?����?�@��

���� ���!�8�!�����-���+��!�,�8�����������&����1���+�������+��$1+���=���(������ �C5��-���*���������2??���2�>@BA?�@B�5��

2?�� "����!�N�:�!�0+��!�'�-�!���+������1�$!�8���!�"� ��!�)�!�:=��+�&!�-�R�!�)��$��!�)�!�)1���!���!�K����!�)�!����1���&!�6�!����1�!�-�'�!�������8����� ���������� �� �@�����$�������������&����+�1������ ������������+����������������&����=���������1�C5��*����%���2?�@����C>A���A����

2��� K����!�)�!�"����!�N�:�!���$!���N�!�"����!�"�:�!�����#���!�*�!�6$�!�K�!�)1���!���!�J�1�������!���!�K������!�'�!����1�!�-�'�!����������1���1�� �@����������C5��������$����$&���������������+��1$��'�����1��2?�B��

22�� 3��!�"�-�!�E$!�.�K�!�.�!�J�!�.$!�R���!��+��1!���3�!�.$��1!�-�3�!�E$!�R�!�.$��1!�*�3�!�����8�!�3��.�1+������������ �(����=�����1����������������������������$�������������+�1�����/$�&�$���������������)����+�����"$�1�2?�@���A>��BB���A5��

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

25�� *��!�-�3�!�8$�!�%���!�8�!�3�.�!�9��1!���!��+��1!���8�!��+�$!�J�,�!�*+��!�,�E�!�3$�!�,���!��+��1!�*���!�����*��!�3��.�1+������������ ��������������������+�������&������������������1������� ���������������������������������������&�������+�&����+���%���*�&&$��2?�2��@2B>B5B�B@2��

2@�� �+��1!�*���!�*��!�3�!�3$�!�,���!�*+��!�6�6�!�����8��!������:�������������������� �����������������1��������1�� ����������+�������$�����������&���.����+���1��2?�2��B?>���@���2@��

2C�� ����$�+�!���!�-�������!���%�!�J��1$���!�)�!�6�������!�,�!�����-���+��!�,�8��'�������������� �������!���(���� ��1���9K)�=�����1������!����1������������������+�&����+���%���*�&&$�����A��255>�C@��B?��

2B�� -�+���!���!�0��&��!�-�!�8���(4�!�)�!�9��4!�-�!��$��(���!�,�!�"(��(!�-�)�!�����6��� �!����)�&������������� �1��������������=�����=��&��4�����������1��$��&��� ����&��� ������&������=�������������������*������%��������2?�5���@?>2���252��

2A�� 6��� �!���!�"$�����4!���!��$��(���!�,�!�����8���(4�!�)��'�������$������������������ ��������������+����1���������$��� �=��&��4����$���1���������&���������������&����������$�1����������8�"�'���2?�5���>��22@���

2��� -����+�!�.�!�)#�&�!�%�!�8$�!�*���!�3�&�1$�+�!�����!�����"���=��4!���"��E�C�����������6J�=�����1�����1�����&�����������������1���������� ������$����#$����"�������2?�2��55�>�?����5��

2��� .����!���!�)4���!�)�!��+�����!���0�!�J��1$���!�9�'�!�6�������!�,�0�!�E�����&�!���'�!�*+�!�0�%�!�����J�����!���%��-�$���&������ ��������������&���������&����1��������=����������&����)��������������*������%���2??A��BA>�A2���A5?��

5?�� %����=�$+!�,�!�E��1!�R�!�����.�+�!�E�*��6���&�������1+������EK�I=������������1�����1����������+��&�����"���2?�@��5C>�?5��?���

5��� E+��!���9�!�*+���!�)�,�!�����9�����!�9�E��9����1$������� �E�I=������������1�����1����1����������������������6�����������1��2?�2���@2>2���252��

52�� 3��1!�,�!��+��1!�E�!������!���-�!�*+��!�R�!�.�!�R�!�����8�$!�*��)����&��$���������������F)�*H��� ������������1$�����=����������+��+�������������$=�/$�������������������������������,������*+�&�2??B��2��>�AAC���AACA��

55�� 9��1!�9���!�-�+���!�*�"�!�9��1!�8�.�!�)1=����!�:�)�!�����3��1!�N�E������������� �+��1$������+���0�$�����4�� �����F0�$�����4�� �����@H�

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

1�������+��+$&��������������������������%0'���������������*9R2��'���1����2??���2?>@��@�@��?��

5@�� �������E�����1!�-�!�"���+�!���!�N�����#!�*�!����8�$!�E�!�'���1!�:�!�.$������!�)�!���������.���!�0�!������!���!�*�$���$��!�9�!�.���&��!�)���!��������+��=���������I�*J�@���&�����&�������������1������+���������������������������������*����2??2�����>2@��2C?��

5C�� 9��!�8���!�']%�$�4�!�0���!�"�&��!�,�!����+�+��1���+!�9�J�!�������!�,�.�!�*������!�.�!�����8���!�"�E��)��%������������&����*���$����9� ��������������%����=���+���*���.�&�����������*���������*�������*����2?�C���B�>�C5���CC2��

5B�� "��!���!�N����!�%�6�!�"����!�.�,�!��������E�����1!�-�!����4��!�K�!�"��1�!�9���!�������!�,�.�!�)=�!�)�!�0$#���!���!������!���,�!�������"��1���81�C���&�������=$������������$����$�$��������������+�$���&�����+�&������+���K�$���2??���@C�>2B2�2BC��

5A�� 8��!�9�,�!�9$!�-�!�8��!�6�8�!�����-���+��!�,�8����������� ����������������� �&����� ������������ ������������1$���������+���������=��������1�������������������+�&����+���%���*�&&$��������2B2>��5��2?��

5��� .�+�!�"�!�,��4���!�%�!�"��&���!�.�!�.$���!�"�!�����.��&�4��1!�.��"K):8�����&�%�5@�� ���� ���������1$������� ��KJ2��I��������&������+������&�����+�&��������������-�'�,�2?�5��52>5?A��5?�C��

5��� .�+�!�"�!�����.��&�4��1!�.���KJ2��I������>������������������+������&�����+�&�����������!���&����!�������������,�-���-���F����H�2?�@���2>CA��C����

@?�� "��!�0�E�!�%�+!�0�.�!��+������!�9�%�!����4!�"���!�8��!�"�0�!�����0��1!�0�"���KJ2���4���4��������$��������1������� ����������� �+$&���&$��������&����������������������������*�������������2?�5��22>2��@?��

�� �

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

��8��1����#�����+���$+����+��4�+��-����$���������1��*����� �+��<-�99%*��5?�90�?5@�55�����J�������4�8��-�9������:::� ����������1���+���&���������&��� ���+��ZNF148���&����������+�&���� �1$�������1���� �

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

�������*�������

�������9������� ����34)&56���������0������������(�(������ ���1�!�

�����������'�' ��%������������&�1��� ���������������������

�&&$��+����+�&����������������$���1����������������� ����$��&�����������

��&����&���+$&���������F)!��H;������&��F*!�9H;�)�����������&�!�"�1����F�!�

JH;�"�1��2�F6!�.H;�"�1��5�F:!�,H;�"�1��@�F0!�8H��-�1�� ������>��??Z�����@??Z�

���+����������+�����1+����������� �+���&&&$��+����+�&�����������1� ���

�������F-H����β−�������FKH����������� $������� �+��+�����1���������$��� ���

��&����1�+������1��$�����������&�����=��0�$�4���E�������*$������ �

O�$������� ����������P� ���*%*������������2??�&��+��F�B�B������H� ���

) �&�����ZNF148���=�������1�����BFCOL1�����BERF-1�F'!��H��.�%��Q�

.�(����������

�������:,�(������� ���������+�Zfp148�������������������� ���$��

��#��������VC:Apc+/FL #�����F)H�E������=�������F�H�&%K)�������� ����������

����β�*������������� ��&�+�����������&$������ ��������$���&������+�+��

���������1�������Zfp148+/+ FE�H�F�������!2H; VC:Zfp148FL/+�F������5!@H;

VC:Zfp148FL/FL�F������C!�BH����1��@���C�&��+���6)�9.�$�������+��������1�

��������T$���������*%� ���Zfp148�F������H����ctnnb1 F������H�&%K)�

���&���(�����Hprt�&%K)��"+�������+��&����^"�-� ���KQ�C������&�������

�� ��&������������������_?�?�!�K"Q������1�� ����� �����������������+�����

1�����!���������)K'N)���+��$4��U���)��Apc����������������������+��

�����������+���$&�=��=������1�+��Apc+/FL�&�$����������+��N�����*���FN*H������

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� �

��+�$�FZfp148+/+H������+���������� ������FZfp148+/FLH����=�+�Zfp148�

FZfp148FL/FLH����������F*H�"�������������� �"����������.G���F��H� ��&�VC:Apc+/FL;�

VC:Apc+/FL:�Zfp148+/FL;�VC:Apc+/FL:Zfp148FL/FL�&�����:�����Q�2?���F9H�E������

=��� ��������������������������� ����������$���&������+�+�����������

1�����������F�H�&%K)�������� ���Zfp148�F������H�����ctnnb1�F������H�

&%K)����&���(�����Hprt��"+�������+��&����^"�-� ���KQ�C������&����

�� ��&�����������������_?�??5!�����_?�???���'�������)K'N)���+��$4��U���

"�����1��+�� �+���$&=���� ���������&�$��� ���+�����������1����������

+����������FJH�����������F6H��"+��������+��&�����^"9����_?�?2����

����_?�??�!�K"�Q������1�� ����!���������)K'N)���+��$4��U���F.H�9����=$����

� �������������F������� ������$&=���� �����H����1�����;�F:H�9����=$����

� �������(��F������� ������$&=���� �����H����1�������K�Q�A�&�������

1�������

�������;,�β−� ����&���������������1!���<������34)&56��F)H�

�+��&����1��+��� ������������������������������ ��&�989��!�%0'!�"E@�?�

����0-�2������������5����4��� ������� ����1�����&=����F��*��H������%K)�

���1��� ���ZNF148�F��ZNF148H�����CTNNB1�F��CTNNB1H��F�H�K$&=���� ����������

��$�����������F������������ �+������&=����������1�������������*��H� ���

���+����������"+�������+��&����^"�9�� ���KQ�5������&������ ��&������

�����������_?�?2!����_?�??2����������_?�???����K����1�� ������� ����������+��

������1��� �%0'�����0-�2�����������&��1�+��5����&���1��$���F*H�-���

������� ���������=����� ������+�� �+��@������������� ���@��������"+�������+��&����

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� �

^"�9�������������1��� �+������&=����F"*%H�������!����_?�??2!�����_?�??2!�

�����_?�???�!���������)K'N)���+��$4��U������F9H�E������=���� ��������

����β−��������������������������&���(�����6)�9.�� ������� ������� �

��%K)����1����F�H�E������=���� ������������β−�����������������������

���&���(�����6)�9.�� ������� ������� ����������1��&�$���� �ZNF148

��������������������9K)��FJH�K$&=���� �����������������1��+��������

$������� ����������1��&�$���� �ZNF148 �������������������� �����

��&�������+���9K)��&��������F?��1H��"+�������+��&����^"�9�� ���K�Q�5�

�����&���!�����_?�??����&��������&��������$���1���������)K'N)��

%�����������+��&����1��+��� �+����������������������������+����

=����� ������+��&�$��� �ZNF148��������������������� ������

�������=,�7�������+�Zfp148 �����������������+�VC:Apc+/FL ��!��������

�+�����������&����1��+��� ���������&��+���1�� ��&������������� �������1�

�����������1������ ��&�F)H�E��F��������&��+���1�H�����F�H�VC:Apc+/FL��

FApc+/�IECH�&����F�+������&��+���1�H���F*H�6��+��+����+��������1��� �

��������F=���4H�����$���+�������F1���H���+���+���$�$���������������1��� ��&�

5�����1������1�������F9H��+�����������&����1��+��� ����������$�$����

���1������F*�����1�����E�!�Zfp148�IEC!�Apc+/�IEC�����Apc+/�IEC>Zfp148+/�IECH�

���!�5������������� �������1������������1�������F�H�6��+��+����+��&����

������1��� ���������&��+���1�����������$�$����F���������`��+������H���

����5����������� ���5�����1����$�$��������������� ��&�5�&�������1�������

"+��������+��&�����^"�-!����_?�??�!�����_?�???��=���������)K'N)��

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

��������,�34)&56���������!��CTNNB1����#�����F)H�"�+�&����� �+��+$&���

CTNNB1 ��&������*%���&���������$�������&�� ��5���1������ �+����&����

F����1������!2!5H�=�������C5���������=�$����&� ��&�+���������������

�������� �������1�*+:����+�����������=������*%����$�������������(��������

�M��1������1�������=��/�*%������������� �+����$������_?�??�!���������

)K'N)���+��$4��U���*+��&�1�����)�F*.%)H�����$����������$��������

��&������������������������+��:16���1�������������F�H��-")�$���1�+��2C�

=��������=�����1����� ��&�+��CTNNB1 ��&��������2?�=�$����&� ��&�+��

��������� ������������$�������+��E����=��F������������������������$��

=�����1����� ����������������!���2B�����6*****�1�1�1����H;��$���������

&$������)����������������������$����������F-$H��8�����>����=�;�8����2>�B�

S1��$�����������;�8����5>��??��&������������� �E�����1�;�8����@>��??��&�����

�������� �-$����1�;�8����C>��S��"�����=����F������4����������"���$���+� H;�

8����B>��S������������=���;�8����A>�2S������������=���;�8�����>�5S���������

���=���;�8�����>��S�����+�� �"����������������=�����F*H�9K)�) �����

�����������)�����F9)�)H�$���1�+��E��=������������=����8�����>���$�

�$�����������;������2>�������������+�E����=�;������5>�E����=��Q��??Z�

&������������� �E�����1�;������@>��??Z�&��������������+�-$����1�����������+�

+������������=������K$������������� ��&�"E@�?�������$���� ���=�+��-")�

����9)�)��F9H�"�+�&����� �ZNF148��9K)����������������������9K)��J��� ���

�$�� ����������������&���(�����%�������� ������� ������� ��$�� �������������

68@!��9K)����J$������1+�FJ8H���������������������&�����+��CTNNB1

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

� ��

����������&���F�C�����`�@AH���+�$������+�+��2�=�&$���������2?�F-$H����

������=����=�������� ���������"E@�?����.�02�5�������F�!�6H���+��

CTNNB1−�$�� �������������������� �������+� $������1+�������������������

�����$���FJ8�������!�a*���!�a�����J��1���H�����"E@�?����.�02�5�������FJ!�

.H���������������+��&������ �KQ�C������&������ ��&��������������^"�9��

��_?�?C;�����_?�??C!���������)K'N)���+��$4��U���

��������,�β&� �������������!� ZNF148����#�����F)H�"+��������+�&����� �

+��+$&���ZNF148���&������+�$������*JI8� �=�����1����������� �����F�H�

�*%���&���������$�������&�� ��5���1������ �+����&����=�������2��A�����

�B?B�=�$����&� ��&�+����������������������� �������1�*+:����+��������

���=������*%����$�������������(���������M��1������1����*+��&�1�����)�

F*.%)H�����$����������$����������&������������������������+��:16�

��1�������������F*H��*%����$��������������+�+�����=��������������(���

=��/�*%������������� �+����$�������_?�???�!���������)K'N)���+��$4��U���

F9H�:��$������ �ZNF148�&%K)����"E@�?�������=��E�5)���������1������������

&��������+����������� ����������������1�����������"553��*������Q�&�����

��&��������� �����8��������K�Q�5������&��������������!���_?�?C!����_?�?��

�����������9K)�������������!���������)K'N)���+��$4��U����

��������,�����+��1 ������� �����+�β−� ������$�34)&56���"�+�&����

�$&&�����$11����1�+����������$���������������������� �����������+��

���&����������+��$�����+�&���������������������� ��������� �)�*� $�������

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

on March 18, 2018. ©

2016 Am

erican Association for C

ancer Research.

cancerres.aacrjournals.org D

ownloaded from

Author m

anuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited.

Author M

anuscript Published O

nlineFirst on O

ctober 10, 2016; DO

I: 10.1158/0008-5472.CA

N-15-3150

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150

on March 18, 2018. ©

2016 Am

erican Association for C

ancer Research.

cancerres.aacrjournals.org D

ownloaded from

Author m

anuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited.

Author M

anuscript Published O

nlineFirst on O

ctober 10, 2016; DO

I: 10.1158/0008-5472.CA

N-15-3150

Published OnlineFirst October 10, 2016.Cancer Res   Bryan E Essien, Sinju Sundaresan, Ramon Ocadiz-Ruiz, et al.   -catenin expression in colorectal cancer

βTranscription factor ZBP-89 drives a feedforward loop of

  Updated version

  10.1158/0008-5472.CAN-15-3150doi:

Access the most recent version of this article at:

  Material

Supplementary

  http://cancerres.aacrjournals.org/content/suppl/2016/10/08/0008-5472.CAN-15-3150.DC1

Access the most recent supplemental material at:

  Manuscript

Authoredited. Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been

   

   

   

  E-mail alerts related to this article or journal.Sign up to receive free email-alerts

  Subscriptions

Reprints and

  .pubs@aacr.orgDepartment at

To order reprints of this article or to subscribe to the journal, contact the AACR Publications

  Permissions

  Rightslink site. Click on "Request Permissions" which will take you to the Copyright Clearance Center's (CCC)

.http://cancerres.aacrjournals.org/content/early/2016/10/08/0008-5472.CAN-15-3150To request permission to re-use all or part of this article, use this link

on March 18, 2018. © 2016 American Association for Cancer Research.cancerres.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 10, 2016; DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-15-3150