SILENZIAMENTO O TAGLIO DEL GENE?

Marina Frontali- Istituto di Farmacologia Traslazionale del CNR, Roma marina.frontali@ift.cnr.it

AICH-ROMA 17 dicembre 2016

Aggiornamenti

GLI ASO oligonucleotidi antisenso che silenziano il gene

GACCCTGGAAAAGCT

HTT RNA

T

TTT

GG G

G

CC

C

A

A ASO

Il gene continua a produrre RNA

Reversibilita dell’azione degli ASO

ASO sono piccoli e non specifici per mutazione

Schema sperimentale

10 mg

10 mg

10 mg

10 mg

Post-treatment Period

30 mg

30 mg

30 mg

30 mg

Post-treatment Period

50 mg

50 mg

50 mg

50mg

Post-treatment Period

70 mg

70 mg

70 mg

70 mg

Post-treatment Period

screen

screen

screen

screen

Gruppo C 8 pazienti

Gruppo D 16 pazienti

Gruppo A 4 pazienti

Gruppo B 8 pazienti

COLPIRE IL DNA INVECE CHE RNA

Proteine zinc-finger che inibiscono la espressione del gene mutato

RepressoreZFP- CAG 11

Esone 1 mutato

Esone 1 wildtype

Wilson 2003

Garriga et al 2012

ZPF - Riducono preferenzialmente HTT

mutata colpendo triplette CAG- Riducono HTT mutata del 60%

- Possono colpire altri geni con triplette CAG?

- Durata del trattamento?

http://www.investorvillage.com/smbd.asp?mb=1933&mn=71872&pt=msg&mid=14737077

TAGLIARE VIA IL GENE MUTATO

Si puo farne a meno?

COLPIRE IL DNA INVECE CHE RNA

Mutazioni rare dell’HTT (Rodan et al Eur. J. Hum. Genet 2016)

Grave ritardo grave mentale e motorio

Portatrice sanamutazione HTT(c.[8156T>A]

x Portatore sanomutazione HTT(c.[4469+1G>A]

x

(c.[8156T>A] (c.[4469+1G>A]

x xMut. HTT Mut. HTT

DISTRIBUZIONE DEGLI APLOTIPI IN 699 INDIVIDUI CON CAG>35 E 1676 CONTROLLI. Lee et al 2012

Fibroblasti di paziente con 17/44 CAG Aplotipo1 (il piu frequente con mutazione) 44 CAGAplotipo 8 (il meno frequente con mutazione) 17 CAG

VANTAGGI SVANTAGGIASOAgisce su RNA

Somministrazione diretta (no virus)Diffusione in varie parti del cervelloTrattamento reversibile

Ripetizione del trattamentoDisattiva anche gene normale

ZINC-FINGERReprime la trascrizione del gene mutato

Silenzia prevalentemente il gene mutato e parzialmente il sano

Somministrazione viraleDiffusione nel cervello?Ripetizione trattamento?

CRIPR-CAS9Taglia via parte del gene mutato e lascia integro il sano

Trattamento permanente Trattamento non reversibileTrattamento personalizzatoSicurezza?Somministrazione?

CONCLUSIONILe prima tappe della sperimentazione sul silenziamento genico con

ASO ci dicono che il farmaco sembra sicuro e ben tollerato

Se tutto va bene nelle tappe succesive della sperimentazione con ASO bisogna attendere almeno fino al 2025 perche’ il farmaco

possa essere approvato per l’uso pubblico

Nel frattempo si sperimentano altre strade che - facilitino la diffusione di silenziatori del gene in tutto il

cervello- utilizzino la via ematica senza ricorrere alla via intratecale, o

chirurgica

Bambini come questi, affetti da Atrofia Muscolare Spinale tipo1, oggi stanno seduti e si muovono con la terapia sperimentale con ASO

https://www.youtube.com/watch?v=t8LuD6AKu2E