Post on 16-Feb-2020
PENGARUH EKSTRAK DAUN JERUJU (Acanthus ilicifolius L.) TERHADAPFOLIKULOGENESIS PADA OVARIUM MENCIT (Mus musculus L.)
( Skripsi )
Oleh
Oksa Trinanda
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAMUNIVERSITAS LAMPUNG
BANDARLAMPUNG2018
ABSTRAK
PENGARUH EKSTRAK DAUN JERUJU (Acanthus ilicifolius L.)TERHADAP FOLIKULOGENESIS PADA OVARIUM MENCIT
(Mus musculus L.)
Oleh
Oksa Trinanda
Jeruju (Acanthus ilicifolius) merupakan tanaman yang hidup di kawasanmangrove,dan sangat jarang di daratan. Tanaman jeruju memiliki kandungansenyawa metabolit sekunder seperti senyawa glukosida, alkaloid, flavonoid, asamlemak, steroid, lignan, komponen fenol dan terpenoid. Kandungan senyawametabolit pada daun jeruju dinilai bersifat antiestrogenik karena memiliki strukturkimia yang menyerupai struktur estrogen pada tubuh sehingga digunakan sebagaiantifertilitas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak daunjeruju terhadap perkembangan folikel pada ovarium mencit. Dalam penelitian ini,akan menggunakan hewan uji mencit betina berumur 3 bulan yang diberi ekstrakdaun jeruju secara oral dan dilihat pengaruhnya terhadap folikulogenesis padaovarium. Percobaan dilakukan menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap(RAL) dengan 1 kelompok Kontrol (K) yang diberi 0,3 ml aquabides/30 grBB,dan 3 kelompok perlakuan yaitu P1 diberi 3,75 mg/30 grBB dalam 0,3 mlaquabides, P2 diberi 7,5 mg/30 grBB dalam 0,3 ml aquabides, P3 diberi 15 mg/30grBB dalam 0,3 ml aquabides selama 14 hari. Selanjutnya, data yang didapatkandianalisis menggunakan metode analisis One Way Anova dan uji BNT pada taraf5%. Hasil pengamatan menunjukkan bahwa ekstrak daun jeruju menurunkanjumlah folikel primer, sekunder, tersier dan de Graff serta diameter masing-masing folikel mengalami penurunan setelah pemberian ekstrak daun jeruju(Acanthus ilicifolius) dan perkembangan folikel terhenti sampai tahap folikeltersier karena banyak folikel yang mengalami artesia akibat pemberian ekstrakdaun jeruju.
Kata Kunci :Tanaman jeruju (Acanthus ilicifolius), antiestrogen, antifertilitas,ovarium, folikulogenesis.
PENGARUH EKSTRAK DAUN JERUJU (Acanthus ilicifolius L.)
TERHADAP FOLIKULOGENESIS PADA OVARIUM MENCIT
(Mus musculus L.)
Oleh
Oksa Trinanda
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar
SARJANA SAINS (S.Si)
pada
Jurusan Biologi
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS LAMPUNG
BANDAR LAMPUNG
2018
Dengan Ridho ALLAH SWT,
Kupersembahkan karya kecilku ini kepada Mama dan Papaku Tercinta
yang selalu senantiasa memanjatkan doa untuk putra tercintanya dan
telah menghantarkan diriku sampai jenjang ini dengan segala daya upaya
tanpa kenal lelah. Juga untuk para sahabat, teman, orang terkasih yang
aku sayangi.
Serta Almamater dan Para Pendidik ku Yang Kusayangi.
MOTTO
Hiduplah kamu bersama manusia sebagaimana pohon berbuah,mereka melemparinya dengan batu, tetapi ia membalasnya dengan
buah. (Abu Hamid Al Ghazali)
Kekuatan terbesar yang dimiliki dunia adalah generasi muda dankecantikan seorang wanita. (Chanakya)
JUST COFFEE, BLACK. LIKE MY SOUL. (Cassandra Clare)
DAFTAR ISI
Halaman
ABSTRAK ................................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN .................................................................. ii
SANWACANA ......................................................................................... iii
DAFTAR ISI.............................................................................................. iv
DAFTAR TABEL .................................................................................. v
DAFTAR GAMBAR ................................................................................ vi
I. PENDAHULUAN ................................................................................ 1
A. Latar Belakang .......................................................................... ... 1
B. Tujuan Penelitian ........................................................................ ... 3
C. Manfaat Penelitian........................................................................... 3
D. Kerangka Pemikiran .................................................................. ... 3
E. Hipotesis ......................................................................................... 4
II. TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................... 5
A. Tanaman Jeruju (Acanthus ilicifolius L.) ........................................ 5
1. Klasifikasi dan Morfologi Jeruju (Acanthus ilicifolius L.)....... 52. Tempat tumbuh dan penyebaran………………………………. 73. Kandungan Kimia Dan Manfaat Tanaman Jeruju……………. 7
B. Biologi Mencit (Mus musculus L.).................................................. 9
1. Klasifikasi Mencit (Mus musculus L.) ...................................... 9
2. Reproduksi Mencit (Mus musculus L.) ..................................... 10
3. Folikulogenesis ......................................................................... 15
1. Folikel Primordial ................................................................ 152. Folikel Sekunder .................................................................. 163. Folikel Tersier ...................................................................... 174. Folikel de Graaf.................................................................... 18
4. Hormon-Hormon Reproduksi .............................................. .... 191. FSH dan LH ......................................................................... 192. Estrogen ................................................................................ 203. Progesteron .......................................................................... 214. Gonadotropin Releasing Hormone (GnRH) ............................... 21
III. METODE PENELITIAN ................................................................. 22
A. Waktu dan Tempat Penelitian ....................................................... 22
B. Alat dan Bahan ..............................................................................
1. Alat ........................................................................................... 222. Bahan ........................................................................................ 23
C. Prosedur Penelitian ........................................................................ 23
1. Persiapan kandang...................................................................... 232. Persiapan Hewan Uji.................................................................. 233. Pembuatan Ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L.) .......... 244. Pemberian Perlakuan ................................................................. 245. Perhitungan Penetapan Dosis .................................................... 256. Pembedahan Mencit (Mus musculus L.) ................................... 25
D. Pengamatan dan Pengukuran Diameter Folikel .............................. 26
a. Trimming..................................................................................... 26b. Dehidrasi ..................................................................................... 26c. Embedding................................................................................... 27d. Cutting......................................................................................... 27e. Staining........................................................................................ 28f. Mounting...................................................................................... 28h. Parameter yang Diamati .............................................................. 28
E. Rancangan Penelitian dan Analisis Data ......................................... 29
F. Diagram Alir Penulisan .................................................................... 30
IV. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ................................ 31
A. Hasil Penelitian ............................................................................... 31
1. Jumlah Folikel............................................................................ 312. Diameter Folikel......................................................................... 33
B. Pembahasan ..................................................................................... 36
V. KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................... 42
A. Kesimpulan ..................................................................................... 42B. Saran ................................................................................................ 42
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 43
LAMPIRAN............................................................................................... 47
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
1. Jumlah folikel primer pada ovarium mencit setelah pemberianekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L)…………………… 31
2. Jumlah folikel sekunder pada ovarium mencit setelahPemberian ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L)….…… 31
3. Jumlah folikel tersier pada ovarium mencit setelah pemberianekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L)…………………… 32
4. Diameter Folikel Primer pada ovarium mencit setelahPemberian ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L)........... 33
5. Diameter Folikel Sekunder pada ovarium mencit setelahPemberian Ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L).......... 33
6. Diameter Folikel Tersier pada ovarium mencit setelahPemberian ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L).......... 34
7. Hasil analisis uji statistik One Way ANOVA pengaruhekstrak daun jeruju terhadap jumlah folikel primerpada ovarium mencit ............................................................. 47
8. Hasil uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pengaruhekstrak daun jeruju terhadap jumlah folikel primerpada ovarium mencit ............................................................. 47
9. Hasil analisis uji statistik One Way ANOVA pengaruhekstrak daun jeruju terhadap jumlah folikel sekunderpada ovarium mencit ............................................................ 48
10. Hasil Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pengaruh ekstrakdaun jeruju terhadap jumlah folikel sekunder padaovarium mencit ................................................................ 48
11. Hasil analisis uji One way ANOVA pengaruh ekstrakdaun jeruju terhadap jumlah folikel tersier padaovarium mencit ............................................................... 49
12. Hasil Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pengaruh ekstrakdaun jeruju terhadap terhadap jumlah folikel tersier padaovarium mencit ............................................................... 50
13. Hasil analisis uji statistik One Way ANOVA pengaruhekstrak daun jeruju terhadap diameter folikel primerpada ovarium mencit ............................................................. 50
14. Hasil uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pengaruhekstrak daun jeruju terhadap diameter folikel primerpada ovarium mencit ............................................................. 51
15. Hasil analisis uji statistik One Way ANOVA pengaruhekstrak daun jeruju terhadap diameter folikel sekunderpada ovarium mencit ............................................................ 52
16. Hasil Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pengaruh ekstrakdaun jeruju terhadap diameter folikel sekunder padaovarium mencit ................................................................ 52
17. Hasil analisis uji One way ANOVA pengaruh ekstrakdaun jeruju terhadap diameter folikel tersier padaovarium mencit ............................................................... 53
18. Hasil Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pengaruh ekstrakdaun jeruju terhadap terhadap diameter folikel tersier padaovarium mencit ............................................................... 53
1
I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Indonesia memang sangat kaya dengan sumber daya alamnya yang
melimpah, tumbuhan yang memiliki potensi atau nilai pengobatan bisa
dimanfaatkan khasiatnya serta luar biasa kualitas yang di hasilkan dari
memanfaatkan tumbuhan tersebut, salah satunya dari manfaat akar, daun
dan biji tumbuhan jeruju (Anastasika, 2007).
Jeruju (Acanthus ilicifolius) hidup di kawasan mangrove, dan sangat
jarang di daratan. Memiliki kekhasan sebagai herba yang tumbuh rendah
dan kuat, yang memiliki kemampuan untuk menyebar secara vegetatif
karena perakarannya yang berasal dari batang horizontal, sehingga
membentuk bagian yang besar dan kukuh. Bunga kemungkinan diserbuki
oleh burung dan serangga. Biji tertiup angin, sampai sejauh 2m. Jeruju
(Acanthus ilicifolius) merupakan tanaman herba rendah, terjurai di
permukaan tanah, kuat, agak terkayu, tinggi mencapai 2m. Cabang
umumnya muncul dari bagian-bagian yang lebih tua. Akar udara muncul
dari permukaan bawah horizontal (Suryono, 2013).
Gaurin, (2004) menyatakan bahwa daun jeruju berkhasiat sebagai obat
hepatitis, leprosy, neuralgia, asma, diabetes, diuretik cacing gelang,
2
rematik, penyakit kulit, sakit perut, antifertilitas, tumor dan borok (resin).
Tanaman jeruju memiliki kandungan senyawa metabolit sekunder
terutama pada bagian batang, akar, daun dan biji. Jeruju atau Acanthus
ilicifolius L. mengandung senyawa glukosida, alkaloid, flavonoid, asam
lemak, steroid, lignan, komponen fenol dan terpenoid (Kanchanapoom
dkk, 2001).
Berdasarkan penelitian-penelitian sebelumnya mengenai tanaman yang
berpotensi sebagai antifertilitas, memiliki kandungan senyawa-senyawa
alkaloid seperti flavonoid, triterpenoid saponin, minyak esensial, dan
fitosterol. Diduga kandungan tersebut ada yang bersifat sebagai
antiestrogen yang berperan dalam penghambatan siklus reproduksi
(Wostmann dan Liebezeid, 2008).
Dalam siklus reproduksi betina, salah satu organ yang berperan adalah
ovarium sebagai tempat pematangan ovum. Folikulogenesis tersebut
dipengaruhi oleh mekanisme siklus hormon diantaranya FSH (Follicle
Stimulating Hormone) dan Estrogen yang dikendaikan oleh hipotalamus
pada otak. Kandungan ekstrak daun jeruju yang mengandung senyawa-
senyawa seperti flavonoid, triterpenoid saponin, minyak esensial, dan
fitosterol. Menurut Wostmann dan Liebezeid (2008) golongan senyawa
flavonoid termasuk salah satu golongan senyawa fitoestrogen karena
memiliki struktur yang mirip dengan estrogen. Sehingga flavonoid dalam
ekstra tersebut akan berikatan dengan reseptor estrogen dalam tubuh dan
akan mempengaruhi sekresi hormon FSH (Follicle Stimulating Hormone)
3
oleh hipotalamus yang merupakan hormon yang berperan penting dalam
pematangan ovum. Kadar estrogen yang tinggi dalam tubuh, akan
memberikan umpan balik negatif ke hipotalamus untuk menghentikan
sekresi FSH (Follicel Stimulating Hormone). Bila FSH terhambat, maka
folikulogenesis akan terhambat juga dan menyebabkan pematangan ovum
tidak berjalan.
B. Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun jeruju
(Acanthus ilicifolius L.) terhadap jumlah, diameter, serta perkembangan
folikel primer, sekunder, dan tersier, dan pada ovarium mencit (Mus
musculus L.)
C. Manfaat Penelitian
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah dan
gambaran umum bagi masyarakat mengenai dampak dan manfaat daun
jeruju terhadap perkembangan folikel primer, sekunder, dan tersier pada
ovarium mencit (Mus musculus L.) betina. Agar selanjutnya dapat diteliti
dengan hewan tingkat tinggi lainnya
D. Kerangka pikir
Tanaman yang berpotensi sebagai obat telah ditemukan di hutan mangrove
Indonesia (Hamdani, 2007). Hutan mangrove Indonesia memiliki keunikan
dan kekhasan keanekaragaman hayati yang terbesar di dunia. Seperti
4
banyak ditemukannya tumbuhan bergenus Acanthus pada ekosistem
mangrove. Salah satu jenis dari Acanthus yang dimanfaatkan sebagai obat
yaitu Acanthus ilicifolius L. yang dikenal dengan jeruju. Kandungan
senyawa-senyawa alkaloid seperti flavonoid, triterpenoid saponin, minyak
esensial, dan fitosterol. Mungkin diantara kandungan tersebut ada yang
bersifat sebagai anti estrogen yang berperan dalam penghambatan siklus
reproduksi.
Setiap bagian dari akar, batang, daun, biji dan bunga tanaman jeruju ini
memiliki banyak manfaat. Namun, bagian daun tanaman jeruju inilah yang
paling banyak dimanfaatkan sebagai obat. Untuk mengetahui pemanfaatan
ekstrak daun jeruju, maka perlu dilakukan penelitian guna mengetahui
tingkat keamanan apakah daun jeruju sebagai obat menghambat
perkembangan folikel primer, sekunder, dan tersier pada ovarium mencit
(Mus musculus L.).
E. Hipotesis
Hipotesis yang diajukan dalam penelitian ini adalah ekstrak daun jeruju
(Acanthus ilicifolius L.) dapat menghambat jumlah, diameter, serta
perkembangan folikel primer, sekunder, dan tersier pada ovarium mencit
(Mus musculus L.)
5
II. TINJAUAN PUSTAKA
A. Tanaman Jeruju (Acanthus ilicifolius L.)
1. Klasifikasi dan Morfologi
Menurut Plantamor (2016) klasifikasi tumbuhan jeruju adalah sebagai
berikut :
Kingdom : Plantae
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Ordo : Scrophulariales
Famili : Acanthaceae
Genus : Acanthus
Spesies : Acanthus ilicifolius L.
Gambar 1. Tanaman jeruju (Biodiversity, 2013).
6
Jeruju merupakan herba rendah, terjurai di permukaan tanah, kuat, agak
berkayu, ketinggian hingga 2 m. Cabang umumnya tegak tapi cenderung
kurus sesuai dengan umurnya. Percabangan tidak banyak dan umumnya
muncul dari bagian-bagian yang lebih tua. Akar udara muncul dari
permukaan bawah batang horizontal (Noor et al., 2006).
Daun jeruju memiliki dua sayap gagang daun yang berduri terletak pada
tangkai. Permukaan daun halus, tepi daun bervariasi: zigzag/bergerigi
besar-besar seperti gergaji atau agak rata dan secara gradual menyempit
menuju pangkal. Unit dan letak: sederhana, berlawanan. Bentuk: lanset
lebar. Ujung: meruncing dan berduri tajam. Ukuran: 9-30 x 4-12 cm (Noor
et al., 2006).
Jeruju (Acanthus ilicifolius) hidup di kawasan mangrove, dan sangat
jarang di daratan. Memiliki kekhasan sebagai herba yang tumbuh rendah
dan kuat, yang memiliki kemampuan untuk menyebar secara vegetatif
karena perakarannya yang berasal dari batang horizontal, sehingga
membentuk bagian yang besar dan kukuh. Bunga kemungkinan diserbuki
oleh burung dan serangga. Biji tertiup angin, sampai sejauh 2 m. Jeruju
(Acanthus ilicifolius) merupakan tanaman herba rendah, terjurai di
permukaan tanah, kuat, agak terkayu, tinggi mencapai 2m. Cabang
umumnya muncul dari bagian – bagian yang lebih tua. Akar udara muncul
dari permukaan bawah horizontal (Suryono,2013).
7
2. Tempat tumbuh dan penyebaran
Biasanya pada atau dekat mangrove, sangat jarang di daratan. Memiliki
kekhasan sebagai herba yang tumbuh rendah dan kuat, yang memiliki
kemampuan untuk menyebar secara vegetatif karena perakarannya yang
berasal dari batang horizontal, sehingga membentuk bagian yang besar
dan kukuh. Bunga kemungkinan diserbuki oleh burung dan serangga.
Biji tertiup angin, sampai sejauh 2 m. Di Bali berbuah sekitar Agustus
(Noor et al., 2006).
Mahkota bunga berwarna biru muda hingga ungu lembayung, kadang agak
putih. Panjang tandan bunga 10-20 cm, sedangkan bunganya sendiri 5-
4 cm. Bunga memiliki satu pinak daun penutup utama dan dua sekunder.
Acanthus ilicifolius dan A. ebracteatus merupakan spesies merambat yang
biasa tumbuh hingga setinggi 2m. Banyak ditemukan pada tanah lunak
yang berlumpur di sepanjang bantaran sungai. Seringkali di daerah
mangrove yang ditebangi. Ada dua spesies utama di Asia Tenggara.
Spesies Acanthus ilicifolius dan A. ebracteatus, di Thailand dan Indonesia,
daun spesies ini diolah menjadi teh herbal karena memiliki khasiat obat.
Jenis yang tidak berduri biasanya dijadikan makanan ternak.Nilai nutrisinya
belum banyak diketahui masyarakat pesisir (Priyono et al., 2010).
3. Kandungan Kimia Dan Manfaat Tanaman Jeruju
Studi fitokimia pada jeruju mengungkapkan bahwa tanaman ini
mengandung senyawa alkaloid, 2 glikosida siklolignan yaitu (+)-
lyoniresinol 3a-O-b-D-galactopyranosyl-(6)-b-D-glucopyranoside (+)-
8
lyoniresinol 2a-O-b-D-galactopyranosyl-3a-O-b-D-glucopyranoside yang
terdapat pada bagian aerial tanaman. Selain itu terdapat juga di dalamnya
glikosida feniletanoid (ilicifolioside A) dan glikosida alcohol alifatik
(ilicifolioside B). Turunan senyawa koumarin acancifoliuside, acteoside,
isoacteoside, canthaminoside, (+)-lyoniresinol 3a-O-beta glucopyranoside,
(-)-lyoniresinol dan alpha-amyrin telah berhasil diisolasi dari ekstrak
metanol daun Acanthus ilicifolius L. (Saroya dan Amritpal, 2011). Hasil
penelitian menunjukkan bahwa ekstrak tumbuhan jeruju dapat membunuh
serangga ulat grayak sebesar ekstrak jeruju adalah 85,8% dan perlakuan
Mimba (pembanding insektisida nabati) hanya mencapai 70,6% (Akbar, B.
2010).
Jeruju berasal dari keluarga Acanthaceace, ekstrak tumbuhan Jeruju
(Acanthus sp), menduduki urutan kedua dengan persentase kematian larva
ulat grayak 85,8%. Tumbuhan ini kebanyakan tumbuh pada lahan-lahan
pasang surut yang berair atau ditepi-tepi drainase atau saluran air. Daun, biji
dan akar Acanthus sp berkhasiat sebagai obat cacing, disamping itu daun
muda berkhasiat sebagai obat sakit perut. Daun, akar dan biji tumbuhan
jeruju (Acanthus sp) mengandung saponin, flavonoid dan polifenol, di
samping itu bijinya juga mengandung alkoloida. Hal ini bahwa kandungan
kimia yang terdapat pada tanaman jeruju adalah saponin, flavonoida dan
polifenol yang banyak terdapat pada daun, akar dan biji Acanthus. Selain itu
bijinya juga mengandung alkaloida, yang bermanfaat untuk mengobati
berbagai penyakit yakni sakit perut, dan juga penyakit cacingan (Saroya dan
Ampritpal, 2011).
9
Daun jeruju mengandung senyawa verbaskosida dan asam fenolat. Dari
isolasi ekstrak etanol daun teh jeruju dihasilkan senyawa verbaskosida yaitu
suatu glikosida ester turunan asam kafeat yang diperoleh secara
kromatografi lapis tipis, spektrofotometri ultraviolet dan infra merah,
sedangkan senyawa asam fenolat yaitu asam vanilat, asam siringat, asam
ferulat, asam p-hidroksibenzoat dan asam p-kumarat dapat diidentifikasi
dari ekstrak etanol secara kromatografi lapis tipis selulosa dua dimensi.
(Anantasika, 2007).
B. Biologi Mencit (Mus musculus L)
1. Klasifikasi Mencit ( Mus musculus L.)
Klasifikasi mencit (Mus musculus L.) menurut Priyambodo (2003) adalah
sebagai berikut :
Kingdom : Animalia
Phyllum : Chordata
Class : Mamalia
Ordo : Rodentia
Familia : Muridae
Genus : Mus
Spesies : Mus musculus L.
Mencit adalah kelompok hewan mamalia rodensia (pengerat) yang masuk
dalam famili Muridae. Hewan ini sering ditemukan di dekat pemukiman
10
dengan bentuk seperti tikus kecil. Di alam, hewan ini sering dijumpai
dengan warna hitam-keabuan sementara untuk hewan uji, warna tikus ini
diseleksi yang albino (putih). Hewan mencit sebagai hewan percobaan
sering digunakan dalam penelitian biologi, biomedis, dan reproduksi.
Gambar morfologi mencit dapat dilihat pada gambar 2.
Gambar 2. Morfologi Mencit (Mus musculus L) (Anonim b, 2012).
2. Reprodusi Mencit
Ovarium merupakan organ penting dalam sistem reproduksi. Organ ini
memiliki fungsi eksokrin karena menghasilkan sel telur (ovum) dan juga
memiliki fungsi endokrin karena menghasilkan hormon reproduksi seperti
estrogen dan progesteron (Frandson 1992; Hafez dan Hafez, 2000). Setiap
hewan memiliki sepasang ovarium yang letaknya berbeda pada setiap
jenisnya, namun pada umumnya, ovarium kanan terletak di caudal ginjal
kanan dan ovarium kiri terletak di caudal ginjal kiri (Frandson 1992).
Bentuk ovarium bervariasi bergantung pada jenis hewan dan siklus birahi
(Samuelson 2007; Pineda dan Dooley 2003), tetapi secara umum bentuk
ovarium dapat dideskripsikan sesuai dengan jenis kebuntingan pada hewan.
Secara histologis, ovarium terdiri dari bagian korteks dan medula yang
dibungkus oleh lapisan epitel kubus sebaris yang disebut germinal
11
epithelium. Bagian medula terdiri dari jaringan ikat fibroelastik, jaringan
saraf dan pembuluh darah.
Menurut Partodihardjo (1980), bentuk ovarium pada setiap jenis hewan
berbeda-beda. Berdasarkan jumlah keturunan yang dilahirkan, bentuk
ovarium dibagi menjadi dua, yaitu :
a. Monotocous : Ovarium yang berbentuk bulat panjang atau oval dan
dimiliki oleh hewan yang melahirkan satu anak dalam 1 kali kelahiran.
Contoh : sapi dan kerbau.
b. Polytocous : ovarium berbentuk seperti buah murbei dan dimiliki oleh
hewan yang melahirkan anak dengan jumlah yang banyak dalam satu
kali kelahiran. Contoh : tikus dan babi.
Anatomi organ reproduksi pada mencit betina dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar 3. Sistem Reproduksi Mencit Betina (Wikipedia, 2008).a)ovarium; b) tuba uterina; c) urinary
Fungsi reproduksi wanita memiliki siklus aktivitas yang ditandai dengan
pertumbuhan dan perkembangan dari folikel dominan. Normalnya ovarium
a
b
c
12
akan memproduksi satu folikel dominan yang akan mengalami ovulasi
pada setiap siklus menstruasi. Folikel dominan akan memproduksi
estradiol pada saat fase folikuler dari siklus ovarium. Setelah ovulasi,
folikel akan berubah menjadi corpus luteum yang akan mensekresi
progesteron dalam jumlah besar saat fase luteal dari siklus menstruasi.
estradiol dan progesteron bekerja pada uterus untuk mempersiapkan
kondisi uterus sebagai tempat implantasi embrio.
Proses Perkembangan Folikel (folikulogenesis) dalam Ovarium
Perkembangan folikel ovarium atau folikulogenesis terjadi pada masa
prenatal dan postnatal. Proses awal perkembangan folikel terjadi pada masa
prenatal (Wandji et al. 1996). Sel benih primordial bermigrasi dari kantung
kuning telur menuju ovarium, kemudian berdiferensisi menjadi oogonia.
Sebagian besar oogonia melakukan mitosis sedangkan sebagian lainnya
berdiferensiasi menjadi oosit primer. Oosit primer yang dikelilingi oleh
epitel pipih selapis dikenal dengan nama folikel primordial. Folikel
primordial mengandung oosit yang berada dalam tahap profase I, namun
belum menyelesaikan pembelahan meiosis pertamanya sampai mencapai
masa pubertas. Folikel primordial pada beberapa mamalia seperti rodensia
dan kelinci, melanjutkan proses meiosis pada periode neonatal (Fortune
1994). Folikel yang mengandung oosit mengalami perkembangan ketika
hewan mencapai masa pubertas. Sel epitel yang mengelilingi oosit berubah
menjadi epitel kubus sebaris (Wandji et al. 1996; Fortune 1994) dan disebut
dengan folikel primer. Folikel primer berkembang menjadi folikel sekunder
dengan karakteristik telah bertambahnya sel epitel yang mengelilingi oosit
13
sampai dengan 5 lapis sel. Zona pelusida mulai terbentuk pada folikel
sekunder, sebagai suatu lapisan tipis di sekeliling oosit. Folikel tersier
merupakan folikel antral yang akan berkembang menjadi folikel de Graaf.
Folikel ini memiliki karakteristik telah terbentuknya antrum folikuli, yaitu
ruangan yang terbentuk akibat perkembangan sel sel folikuler. Antrum
folikuli pada awalnya terpisah, tetapi kemudian bersatu menjadi suatu
ruangan berbentuk bulan sabit. Antrum folikuler terus membesar hingga
mendesak sel telur menuju tepian folikel hingga akhirnya terjadi proses
ovulasi.
Pada folikel tersier, sel folikuler di sekitar oosit tetap utuh dan membentuk
kumulus ooforus. Selain sel-sel folikuler, folikel ini dikelilingi oleh dua
lapis jaringan ikat, yaitu lapis teka interna dan lapis teka eksterna. Lapis teka
interna merupakan lapisan bagian dalam yang menghasilkan estrogen dan
kaya pembuluh darah (Aughey dan Frye 2001). Lapis teka eksterna
merupakan lapis luar yang akan bersatu dengan stroma ovarium. Skema
perkembangan folikel dalam ovarium dapat dilihat dalam Gambar 3. Sisa
folikel de Graaf akan berkembang menjadi folikel hemoragikum (korpus
rubrum) setelah terjadi ovulasi. Selanjutnya korpus rubrum berkembang
menjadi korpus luteum yang banyak mengandung sel lutein. Jika terjadi
proses fertilisasi setelah ovulasi, korpus luteum akan berubah menjadi
korpus luteum graviditatum. Jika tidak ada proses fertilisasi, maka korpus
luteum akan mengalami regresi dan berubah menjadi korpus albikan yang
mengandung banyak jaringan ikat.
14
Gambar 4. Proses Folikulogenesis dan Ovulasi di ovarium pada mamalia(Barnes, Rosenfield, 2009).
Reproduksi merupakan faktor penting dalam kehidupan. Reproduksi pada
mamalia erat kaitannya dengan siklus estrus. Hormon progesteron
merupakan salah satu hormon yang berperan penting dalam siklus estrus.
Kadar progesteron dan estradiol dalam tubuh dapat dijadikan parameter
dalam penentuan fase pada siklus estrus (Khanum, 2011).
Siklus estrus merupakan jarak antara estrus yang satu sampai pada estrus
yang berikutnya. Setiap hewan mempunyai siklus estrus yang berbeda-
beda, ada golongan hewan monoestrus (estrus sekali dalam satu tahun),
golongan hewan poliestrus (estrus beberapa kali dalam satu tahun), dan
golongan hewan poliestrus bermusim (estrus hanya selama musim tertentu
dalam setahun). Daur atau siklus estrus terdiri dari empat fase, yaitu
proestrus, estrus, metestrus, dan diestrus. Fase estrus berbeda dengan siklus
estrus. Fase estrus merupakan fase dimana telur diovulasikan dari ovarium
ke saluran telur. Fase ini menandakan bahwa individu betina telah masak
Folikel
matang oositFolikelsekunder
Folikel primer
Stroma
Peleburan korpus luteum
Korpusluteum
Folikelpecah
Ovum
15
kelamin. Fase estrus setiap spesies berbeda-beda dan dapat diamati dengan
metode vaginal smear, tetapi tidak dapat diamati jika hewan betina tersebut
belum masak kelamin dan sedang hamil (Hafez, 2011).
3. Folikulogenesis
1. Folikel Primordial
Secara histologis, folikel primordial mengandung satu oosit primer
berukuran kecil (diameter ~ 25µm) yang tertahan dalam stadium profase
dari meiosis I, satu lapis sel granulosa gepeng atau skuamous, dan lamina
basalis. Dengan adanya lamina basalis, maka akan tercipta suatu
lingkungan mikro yang mendukung pertumbuhan dari sel granulosa dan
oosit, yang mana lamina basalis ini berfungsi agar kontak langsung
dengan sel-sel lain tidak terjadi. Folikel primordial tidak memiliki suplai
darah sendiri dan oleh karena itu hubungan dengan sistem endokrin pun
menjadi terbatas. Seluruh folikel primordial (oosit) dibentuk pada saat
masa fetus diantara umur gestasi bulan ke-6 dan ke-9. Oleh karena itu, dapat
dipahami bahwa semua oosit yang berpartisipasi dalam siklus
reproduksi wanita selama hidupnya telah ada dalam ovarium sejak lahir.
Jumlah folikel primordial atau sel telur dalam ovarium wanita berhubungan
dengan masa reproduksi wanita atau ovary reserve (OR) (Anonim a. 2009).
16
Gambar 5. Folikel Primer Ovarium Mamalia (Singh, 1991). a) oosit; b)inti; c) sel folikel; d) stroma.
2. Folikel Sekunder
Pertumbuhan folikel primer menjadi folikel sekunder merupakan
pertumbuhan tahap kedua dan terjadi pada waktu hewan betina telah lahir
serta menjalani proses pendewasaan tubuh. Hanya sebagian folikel primer
yang akan tumbuh menjadi folikel sekunder (Anantasika, 2007).
Gambar 7. Folikel Sekunder Ovarium Mamalia (Singh,1991). a) zonapelucida ; b) sel folikel menjadi silindris; c) membran basal.
Guyton dan Hall (1997), menyatakan bahwa proliferasi yang berlangsung
cepat dari sel granulosa merupakan tahap awal terbentuknya folikel
sekunder. Setelah proliferasi berlangsung selama beberapa hari, sel-sel
granulosa akan mengesekresi cairan folikuler yang mengandung estrogen.
a
b
c
d
a
b
c
17
Folikel sekunder ditandai dengan oosit mencapai besar maksimal dan
letaknya ekstentrik dalam folikel. Meiosis 1 sampai pada tahap diploten
profase. Sel granulosa terdiri dari 6-12 lapis sel (Yatim, 1994).
3. Folikel tersier
Setelah MVP oosit kita terpilih, terus tumbuh semakin besar sampai
mencapai kematangan. Tahap folikel tersier ditandai dengan kehadiran
bentuk yang besar, berisi ruang cairan di dalam folikel matang, atau folikel
Graafian, yang hanya istilah lain untuk folikel matang. Anda dapat
memberitahu tahap ini selain tahap sekunder karena ruang di tengah folikel,
antrum, lebih besar dan lebih baik didefinisikan pada tahap perkembangan
maka pada tahap folikel sekunder (Airul, 2010).
Gambar 8. Folikel Tersier Ovarium Mamalia (Singh, 1991). a) oosit; b)zona pelucida; c) stroma; d) rongga atrum
a
b
c
d
18
4. Folikel de Graaf
Folikel ini merupakan tingkatan terakhir dalam fase folikuli. Folikel ini
terbentuk karena adanya peningkatan FSH pada ovarium. Folikel de graff
yang matang berisi likuor folikel, mengandung estrogen dan siap berovulasi.
Folikel de Graff ditandai dengan munculnya suatu ruang (kavitas) atau
antrum yang mengandung cairan yang disebut cairan folikuler atau liquor
folliculi. Folikel Graaf dapat juga disebut sebagai folikel antral. Cairan
folikuler adalah eksudat dari plasma yang merupakan hasil sekresi dari
oosit dan sel granulosa. Cairan tersebut merupakan medium yang mana
residu sel granulosa dan oosit serta molekul-molekul regulator harus
melewatinya untuk keluar dari dan melalui membran folikel.
Gambar 9. Folikel de Graff Ovarium Mamalia (Singh, 1991). a.)kumulusooforus; b) oosit; c) zona pelucida; d) duskus proligerus; e)rongga folikel; f) membran granulosa; g) teka interna; h) tekaeksterna.
a
b
cd
e
f gh
19
4. Hormon-hormon Reproduksi
Hormon gonadotropik (GnRH) pada perkembangan folikel sangat berperan
penting. GnRH merupakan hormon yang diproduksi oleh hipotalamus di
otak. GnRH akan merangsang pelepasan Folikel Stimulating Hormone
(FSH) di hipofisis (Campbell et al, 2010). Pada perkembangan awal, tidak
terlihat perlunya fluktuasi siklik sekresi FSH dan LH. Peran FSH dimulai
dengan merangsang pembentukan folikel pre-ovulasi yang kemudian akan
ber-ovulasi dan membentuk korpus luteum yang memiliki respon terhadap
LH. Dengan adanya sekresi hormon luteinizing (LH) yang mendadak (LH
surge), lonjakan LH akan merangsang folikel Graff pecah dan sel telur akan
dikeluarkan, meninggalkan sel folikel untuk menjadi korpus luteum. Pada
sebagian besar mamalia, proses ini terjadi pada masa kehamilan. Setelah
menarche, diperkirakan bahwa waktu yang diperlukan oleh sebuah folikel
primordial untuk menjadi folikel pre-antral besar membutuhkan waktu
sekitar 85-150 hari, sehingga setiap folikel yang berujung dengan proses
ovulasi sebenarnya telah tumbuh sejak paling tidak 3-5 siklus menstruasi
sebelumnya (Drummond, 2006).
1. FSH dan LH
FSH dan LH akan memicu pematangan folikel pada ovarium dan
sekresi estrogen. Sintesis FSh dan lh di atur oleh gonadotropin( GnRH).
FSH berfungsi untuk merangsang pembentukan folikel masak tetapi tidak
menyebabkan sel telur untuk ovulasi. Selanjutnya proses ovulasi akan
dirangsang oleh hormone LH. Folikel yang telah matang kemudian
20
mensintesis dan mensekresi pembentukan estrogen. Pada fase folikel ini
bertepatan dengan fase proliferasi pada uterus, peningkatan kadar
estrogen merangsang endometrium untuk menebal dan mempunyai
banyak pembuluh darah. Kadar estrogen yang meningkat menyebabkan
penghambatan sekresi FSH dan secara langsung merangsang peningkatan
sekresi LH selama fase folikel (Sherwood, 2001).
2. Estrogen
Estrogen merupakan salah satu hormon reproduksi pada hewan betina.
Hormon ini terutama disekresi oleh sel-sel granulosa penyusun folikel
ovarium. Estrogen dibentuk oleh sel-selgranulosa dalam folikel ovarium
melalui serangkaian konversi melalui reaksi enzimatis. Sintesis hormon
estrogen akan meningkat seiring dengan perkembangan folikel dalam
ovarium. Estrogen bekerja dalam merangsang pertumbuhan miometrium
dan endometrium. Peningkatan dalam sintesis reseptor progesteron di
dalam endometrium dipengaruhi oleh hormon estrogen sehingga
progesteron mampu merangsang endometrium tetapi setelah
endometrium tersebut di rangsang oleh estrogen. Estrogen akan
memberikan umpan balik negatife ke hipotalamus bila kadar nya dalam
tubuh berlebih yang berakibat pada penghentian sintesis FSH
(Yatim,1994).
21
3. Progesteron
Progesteron di sintesis oleh korpus luteum setelah proses ovulasi terjadi.
Pasca Ovulasi, folikel de graff akan bertansformasi menjadi korpus
luteum. Korpus tersebut yang akan mensistesis hormon progesteron yang
beperan merangsang kelenjar-kelenjar dalam endometrium . Progesteron
bekerja pada endometrium yang telah dipersiapkan untuk menerima
ovum yang sudah dibuahi. Progesteron juga mempersiapkan
endometrium untuk menampung embrio yang baru berkembang dengan
cara merangsang kelenjar-kelenjar endometrium agar mengeluarkan dan
menyimpan glikogen dalam jumlah besar sehingga menyebabkan
pertumbuhan pembuluh darah endometrium (Sherwood, 2001).
4. Gonadotropin Releasing Hormon (GnRH)
Hipotalamus di otak, akan merangsang pelepasan hormon GnRH yang
merupakan sinyal bagi kelenjar pituitari untuk merangsang pelepasan
folikel stimulating hormone (FSH) sebagai respon posistif dari rendahnya
kadar estrogen dalam tubuh begitupula sebaliknya (Campbell et al,
2010).
22
III. METODE PENELITIAN
A. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan November sampai bulan Desember
2017 di Laboratorium Zoologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam Universitas Lampung. Pembuatan ekstrak daun jeruju dilakukan di
Laboratorium Kimia Organik, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam Universitas Lampung. Untuk pembuatan preparat histologi dilakukan
di Laboratorium Patologi Balai Penyidikan dan Pengujian Veteriner (BPPV)
Regional III Bandar Lampung.
B. Alat dan Bahan
1. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah kandang mencit
yang berbentuk persegi dengan ukuran 15x15cm beserta penutup yang
terbuat dari kawat sebanyak 20 unit, wadah pakan mencit, botol minum
mencit, sonde lambung yang dihu bungkan dengan alat suntik digunakan
untuk pemberian ekstrak secara oral, mikropipet untuk mengambil ekstrak
daun jeruju, gelas ukur, gelas kimia, papan fiksasi, jangka sorong sebagai
23
alat ukur, milimeter blok sebagai alat ukur, seperangkat alat bedah, kertas
label, mikroskop.
2. Bahan
Bahan yang digunakan adalah 20 ekor mencit betina, sekam padi sebagai
alas kandang mencit, pelet sebagai pakan mencit, air minum mencit,
ekstrak jeruju, aquabides, kloroform, kapas, alkohol 95%, pewarna
Hematoxylyn eosin dan alkohol bertingkat.
C. Prosedur Penelitian
1. Persiapan Kandang
Sebelum penelitian ini dilaksanakan, terlebih dahulu disiapkan kandang
dari kawat dengan ukuran 15 x15 cm. Perlakuan terhadap pertama-tama
mencit ditempatkan pada ruangan.
2. Persiapan Hewan Uji
Dalam penelitian ini digunakan mencit (Mus musculus L.) betina berumur
3 bulan dengan berat badan 30-35gram yang diperoleh dari Laboratorium
Balai Penyidikan dan Pengujian Veteriner (BPPV) Regional III Bandar
Lampung. Sebelum penelitian dimulai mencit diaklimatisasi selama satu
minggu dalam kondisi laboratoriumyang bertujuan untuk penyesuaian
pada mencit dalam lingkungan dan perlakuan yang baru dan membatasi
pengaruh lingkungan dalam percobaan. Setiap hari pukul 08.00 WIB
mencit diberi makanan pelet dan air minum.
24
3. Pembuatan Ekstrak Jeruju (Acanthus ilicifolius L.)
Untuk mendapatkan ekstrak jeruju digunakan metode evaporasi. Jeruju
dicuci dan dibersihkan lalu dijemur tanpa bantuan sinar matahari hingga
kering. Selanjutnya ketika daun mengering jeruju kemudian digiling
hingga menjadi serbuk. Setelah digiling serbuk jeruju seberat 500 gram
direndam dalam 5 liter larutan etanol selama 24 jam. Kemudian disaring
menggunakan kertas saring. Cairan hasil saringan tersebut kemudian
dipekatkan dengan cara evaporasi menggunakan alat rotary evaporator
selama 4 jam dengan suhu 50oC dan tekanan 120 atm. Kemudian
didapatkan ekstrak jeruju sebanyak ± 200ml.
4. Pemberian Perlakuaan
Pemberian ekstrak daun jeruju dilakukan dengan cara dicekok (secara oral)
menggunakan spuit yang ujungnya ditumpulkan dan diberi pipa karet
kecil. Untuk setiap perlakuan digunakan 4 ekor mencit betina dengan 5
kali pengulangan. Perlakuan pencekokan ini dilakukan satu kali sehari
selama 14 hari dengan pemberian dosis yang berbeda-beda untuk setiap
kelompok perlakuan. Berdasarkan acuan metode penelitian jurnal
farmakologi dan farmasi klinik (Latifah dkk, 2015) mengenai potensi
tumbuhan mangrove daun jeruju (Acanthus ilicifolius) sebagai obat anti
diabetes dengan menggunakan dosis 125mg/KgBB, 250mg/KgBB dan
500mg/KgBB dalam 1 ml aquadest. Maka, setelah dikonversikan dengan
dosis mencit yang memiliki berat 30 gram, dosis yang diberikan setiap
pergram berat badan mencit yaitu :
25
Berat jeruju = 125 mg x
Berat hewan 1000 g 30g
x = 3,75 mg
Melalui perhitungan di atas, maka kelompok perlakuan dalam penelitian
ini adalah sebagai berikut.
1. Kelompok kontrol, diberi 0,3mlaquabides
2. Kelompok dosis 3,75 mg/30 grBB dalam 0,3 mlaquabides (P1)
3. Kelompok dosis 7,5 mg/30 grBB dalam 0,3 mlaquabides (P2)
4. Kelompok dosis 15 mg/30 grBB dalam 0,3 mlaquabides (P3)
` 5. Proses Pembedahan Mencit (Mus musculus L)
Setelah mencit diberi perlakuan selama 14 hari, kemudian di hari ke 15
dilakukan pembedahan. Mencit yang dibedah terlebih dahulu diberi
kloroform, setelah mencit pingsan dilakukan pembedahan pada bagian
ventral tubuh mencit secara vertikal lalu diambil dan diletakkan pada bak
parafin. Kemudian diambil organ ovariumnya, ovarium yang telah diambil
lalu difiksasi dengan menggunakan larutan formalin 10%. Perbandingan
volume spesimen dengan larutan formalin 1:10 untuk mendapatkan hasil
sempurna. Kemudian dibawa ke Laboratorium Patologi Balai Penyidikan
dan Pengujian Veteriner (BPPV) Regional III Bandar Lampung untuk
dibuat preparat histologi sehingga dapat diamati.
26
6. Proses Pembuatan Preparat Histologi
Pembuatan preparat histologis ovarium mencit ini dilakukan di
Laboratorium Patologi, Balai Penyidikan dan Pengujian Veteriner
(BPPV) Regional III. Adapun cara yang dilakukan dalam pembuatan
preparat sebagai berikut:
a. Fiksasi
Fiksasi adalah suatu proses yang dilakukan untuk sel atau jaringan agar
tetap dalam posisinya dan tidak berubah baik bentuk ataupun ukurannya.
Spesimen hasil nekropsi yang berupa organ ginjal yang berasal dari
kelompok kontrol dan kelompok hewan yang diberi perlakuan paparan
kebisingan dimasukkan ke dalam larutan fiksasi (pengawet), buffer
formalin 1:10.
b. Trimming
Trimming adalah suatu pencucian untuk menghilangkan larutan fiksasi,
dimana Buffer formalin 10% dihilangkan dengan menggunakan air
mengalir selama 30 menit.
27
c. Dehidrasi
Dehidrasi adalah proses yang dilakukan setelah proses trimming. Proses
ini bertujuan untuk mengeluarkan air yang terkandung di dalam
jaringan. Organ diletakkan di atas tisu untuk mengeringkan air. Proses ini
dilakukan menggunakan alat Embedding cassette. Proses selanjutnya
adalah organ tersebut diberi perlakuan sebagai berikut secara berurutan :
Tabel Tahapan Proses Dehidrasi:
Tahap Waktu Zat Kimia
Dehidrasi2 jam Alkohol 80%2 jam Alkohol 95%2 jam Alkohol 95%
Clearing
1 jam Alkoholabsolut I1 jam Alkoholabsolut II1 jam Alkoholabsolut III1 jam Xylol I1 jam Xylol II1 jam Xylol III
Impregnasi2 jam Parafin I2 jam Parafin II2 jam Parafin III
d. Embedding
Proses penanaman jaringan ke dalam media parafin. Tujuannya adalah
untuk mempermudah dalam melakukan proses pemotongan atau
pengirisan sampel. Dilakukan dengan mengeluarkan jaringan yang sudah
diimpregnasi dari moldtray, kemudian menanamnya ke dalam lempengan
blok yang berisi parafin cair. Setelah itu ditutup dengan menggunakan
casette and deckel lalu didinginkan pada cold plat
28
e. Cutting
Proses pemotongan atau pengirisan jaringan dengan menggunakan
mikrotom. Sampel yang dipotong tebalnya sekitar 4-5 mikron.
Pemotongan akan berhasil jika pisau tidak tumpul, tidak berkarat, dan tidak
terdapat sisa- sisa parafin dari hasil pemotongan sebelumnya dan posisi
sampel lurus dan baik. Suhu pisau dan suhu sampel serta suhu ruangan
harus sama agar sampel tidak patah atau terpotong-potong saat pengirisan.
f. Staining/Pewarnaan
Setelah pembuatan preparat selesai, dilakukan pewarnaan dengan
menggunakan pewarna Haematoxylin Eosin. Zat kimia yang digunakan
dalam pewarnaan ini adalah Hematoxylin Kristal, Alkohol absolut,
Ammonium, Aquadest, Mercury oxide.
g. Mounting
Setelah pewarnaan slide selesai, slide ditempelkan di atas kertas tisu pada
tempat yang datar dan selanjutnya ditetesi dengan menggunakan Canada
Balsam dan ditutup dengan menggunakan cover glass dan dicegah jangan
sampai ada gelembung udara.
h. Parameter yang Diamati
Parameter yang diamati dalam penelitian adalah jumlah, diameter, serta
perkembangan folikel primer, sekunder, dan tersier pada ovarium mencit
(Mus musculus L.) setelah pemberian ekstrak daun jeruju (Acanthus
ilicifolius L).
29
E . Rancangan dan Analisis Data
Rancangan percobaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah
Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan masing-masing
perlakuan dilakukan pengulangan sebanyak 5 kali. Dalam penelitian ini
terdapat 20 ekor mencit yang dibagi menjadi 4 kelompok, yaitu 1 kelompok
sebagai kontrol dan 3 kelompok sebagai perlakuan.
Gambar 9. Susunan Rancangan Percobaan
Keterangan :
P = Perlakuan yang digunakan (P1; P2; P3)
K = Kontrol (K)
U = Ulangan (U1,U2,U3,U4,U5).
Analisis Data
Data hasil penelitian dilakukan secara kuantitatif dan deskriptif dengan
menyajikan hasil penelitian berupa presentasi perubahan yang terjadi pada
folikel primer, sekunder, dan tersier dan artesia mencit (Mus musculus L.)
setelah pemberian ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L.).
KU1 P1U1 P2U1 P3U1
P3U2 KU2 P1U2 P2U2
KU3 P2U5 P3U3 P1U3
P1U4 P3U4 P2U3 KU4
P2U4 P1U5 KU5 P3U5
30
F. Diagram Alir Penelitian
Gambar 10. Diagram Alir Penelitian
Persiapan Penelitian
Analisis Data
20 mencit betina di aklimatisasi
Pembuatan Ekstrak Jeruju
Pembedahan dan Pengamatan Serta Pembuatan PreparatOvarium Mencit
Laporan Penelitian
Perlakuan Terhadap Mencit
V. KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak daun jeruju
(Acanthus ilicifolius L.) :
1. Dapat menyebabkan penurunan pada jumlah folikel primer, folikel
sekunder, dan folikel tersier.
2. Dapat mengecilkan diameter folikel primer, folikel sekunder, dan folikel
tersier.
3. Dapat menyebabkan folikel banyak yang mengalami artesia.
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian dengan bahan ekstrak daun jeruju (Acanthus
ilicifolius L.) terhadap ketebalan sel-sel granulosa dan pengukuran kadar
estrogen.
43
DAFTAR PUSTAKA
Airul, 2010. Ovarian follicular dynamics: a review with emphasis on the bovinespecies. Part I: Folliculogenesis and pre-antral follicle development.Reprod Dom Anim.
Agoramoorthy, G.,F.A. Chen.,V. Venkatesalu, P.C. Shea,. 2009.Bioconcentration of heavy metals in selected medicinal plants of India. JEnviron Biol 30 (2): 175-178.
Akbar, B. 2010.Tumbuhan Dengan Kandungan Senyawa Ak tif YangBerpotensiSebagaiBahanAntifertilitas. Adabia Press. Jakarta. Ed 1. Hal59.978602-19751-7-6.
Anantasika, A. 2007. Manfaat tanaman obat jeruju bagi kesehatan PertemuanIlmiah Tahunan (PIT) III- HIFERI 24-27 Januari 2007. Yogyakarta
Anonim a.2009. Alat Reproduksi Wanita. Copyright@asiamaya.com. Diakses 21Juni 2017.
Anonim b. 2012. Digital Library Unila https://www.google.co.id/ . Diakses pada16 November 2017 pukul 20.00
Aughey, E., F.L.Frye,. 2001. Comparative Veterinary Histology with ClinicalCorrelates. London: Manson.
Barnes, R.B ., Rosenfield.2009. The Follicular Phase of the estrous Cycle.Dikutip dari http://www.wisc.edu/ansci_repro//
Biodiversity. 2013. https://www.google.co.id/ tanamanjeruju diakses padatanggal 19 Oktober 2017.
Camara, A.C.L., I.C.N.Gadelha., P.A.C.Borges., S.A.de Paifa., M.M. Melo., andSoto-Blanco, B. 2015.Toxoicity of Gossytol From Cottonseed Cake toSheep Ovarian Folicels. Plos ONE.10(11):1-11.
44
Campbell, N.A., J.B. Reecee., L.A. Urry., M..L. Cain., S.A .Wasserman., P. V.Minorsky., dan R. B. Jackson. 2010. Biologi Campbell Edisi 8 Jilid III.Erlangga. Jakarta.
Digital Library Unila, 2012. Pengantar praktikum struktur hewan. UniversitasLampung. Lampung.
Donnez, J and Dolmans. 2013. Reproductive Endocrinology and Infertility. Austin(US): Landes Bioscience.
Drummond Ann E. 2006: The Role of Steroids in Follicular Growth.Reproductive Biology & Endocrinology 2006, 4:16
Fortune, J.E. 1994. Ovarian follicular growth and development in mammals. BiolReprod 50: 225-232.
Gaurin, 2004. Potensi Mangrove Sebagai Tanaman Obat. Jurnal Biota IX (2) :125-126.
Guyton, A.C.dan J.E.Hall. 1997. Buku Ajar Histologi Kedokteran. Edisi ke-9.Diterjemahkan oleh dr. Irawati Setiawan, dkk. Buku Kedokteran (EGC).Jakarta.
Hafez, B. 2011. Anatomy of female reproduction. Di dalam: Hafez B, Hafez,E.S.E, editor. Reproduction in Farm Animal Ed ke-5. USA: LippincottWilliams and Wilkins. hlm 13-29.
Hamdani, 2007. Mengenal Tanaman Obat Nusantara. PT Panca Anugrah Sakti.Jakarta.
Frandson, R.D. 1992. Anatomi dan Fisiologi Ternak Ed ke-4. Penerjemah: B.Srigandono, Koen Praseno. Yogyakarta: Universitas Gadjah Mada.
Kanchanapoom, T., M.S. Kamel, R. Kasai, K. Yamasaki, C. Picheansoonthon,and Y. Hiraga. 2001. Lignan glucosides from Acanthus ilicifolius.Phytochemistry 56:369-372.
Khanum, 2011. Reliability of follicle- stimulating hormone measurements inserum. Reproductive Biology and Endocrinologyhttp://www.RBEj.com/content/
45
Latifah, E., P, Prasojo dan S. Dhuta. 2015. Potensi Tumbuhan Mangrove DaunJeruju (Acanthus ilicifoilus) SEbagai Obat Antidiabetes. JurnalFarmakologi dan Farmasi Klinik. LP3M Universitas MuhammadiyahMagelang.
Leung, P.C.K., E.Y. Adashi. 2004. The Ovary: Dynamics of Primate FollicularGrowth: A Physiological Perspective. second edition. San Diego (US):Elsevier Academic Pr.
Limbong, T. 2007. Pengaruh Ekstrak Ethanol Kulit Batang Pakettu (Ficus superbaMiq) Terhadap Folikulogenesis Ovarium Mencit (Mus musculus). DalamAbstrak Jurnal Penelitian. Universitas Airlangga. Surabaya.
Meles, D.K dan W. Sastrowardoyo. 2001. Efek Infusa Impatiens Balsamia Linnpada Stadium Pembelahan Sel (Cleavage) dalam Upaya Pencarian ObatAntifertilitas. PPOT. Lemlit. Universitas Airlangga. Surabaya.
Mossa, F.,F, Berlinguer.,S.Succu., M. Madeddu., D. Bebbere., G.G. Leoni., S.Naitana. 2007. Follicle Number Affects in vitro DepvelopmentalCompetence Of Sheep Oocytes Biol. Reprod.2(7)1-7.
Noor Lucia., dan H. Killburn. 2006. Mengenal TanamanObat Nusantara. PT. Panca Anugrah Sakti. Jakarta.http://biodiversitywarriors.org/jeruju-daruju.html. diakses pada tanggal18 Oktober 2017.
Partodihardjo, S. 1980. Ilmu Reproduksi Hewan. Mutiara. Jakarta.Hal. 44-50.
Pineda, M.H.M.P, Dooley, 2003. McDonald’s Veterynary Endocrinology andReproduction Ed ke-5. Iowa: Blackwell Publishing Company.
Plantamor, 2016. Plantamor Situs Dunia Tumbuhan, Informasi SpesiesJeruju.[Internet]. Terdapat pada :http://www.plantamor.com/database-tumbuhan-Acanthus-ilicifolius/ Diakses pada : 25 September 2017.
Priyono, Suharno,B. dan K. Amri. 2010. Deskripsi Umum Tanaman Pepaya.Biopic.com diakses pada tanggal 18 Oktober 2017.
Redha, A. 2010. Flavonoid: Struktur, Sifat Antioksidatif dan Peranannya DalamSistem Biologis. Jurnal Belian , 9, 196-202.
Saptiani, G.,B.P, Slamet., dan A.Sutrisno. 2012..Potensi Tumbuhan MangroveDaun Jeruju (Acanthus ilicifolius) Sebagai Obat Antidiabetes[Skripsi].Fakultas Farmakologi dan Farmasi Klinik. UniversitasMuhammadiyah Magelang.
46
Samuelson, D.A. 2007. Textbook of Veterynary Histology. Missouri: SaundersElsevier Inc.
Saroya, S., dan Amritpal. 2011. Herbalism, Phytochemistry andEtnopharmacology. Hal.336-340. diakses pada tanggal 15 Oktober 2017.
Sherwood, L,. 2001. Fisiologi Manusia dari Sel ke Sistem. Edisi 2. Alih bahasaBrahm U. Pendit; Editor Beatricia I. Santoso. Jakarta:EGC
Silva P. Reproductive Physic dari http://www2.ufp./qfisio/reproduction.
Singh, I. 1991. Teks dan Histologi Manusia. Binarupa aksara. Jakarta. Hal 293.
Suryono, 2013. Tanaman Air Kebun Raya Bogor.Vol. 1 No. 5.Kebun Raya Bogor.Bogor. diakses pada tanggal 18 Oktober 2017.
Susetyarini, E. 2009. Efek Senyawa Aktif Daun Beluntas Terhadap KadarTestosteron Tikus Putih (Ratus norwegicus) Jantan. Jurnal Gamma (5),No. 1, September hal 21-27.
Wandji, S.A., V. Srsen, A.K Voss , J.J. Eppig, J.E. Fortune. 1996. Initiation invitro of growth of bovine primordial follicle. Biol Reprod 55: 942-948.
Wikipedia. 2008. Mus musculus Linn.http://images.google.co.id/images?um=1&hl=id&q=mus+musculus++Linn&btnG=Cari+Gambar. 7 april 2017.
Wostmann dan Liebezeid.2008. Pengaruh Pemberian Ekstrak Jahe Merah(Zingiber officinale Linn. Var. rubrum) Terhadap Libido Mencit Jantan.
Yatim, W. 1994. Reproduksi dan Embriologi. Tarsito. Bandung.