Post on 31-Aug-2019
Laboratorijskadijagnostika u
kliničkoj praksidr Milan Jovanović
Logičan tok kliničkog postupka
Anamneza
Klnički simptomi
Laboratorijski i specijalni dijagnostički postupci
Dijagnoza
TerapijaPrognoza
IstorijaIstorijabolestibolesti
Specijalne dijagnostičke metode
– Laboratorijska ispitivanja krvi i drugih telesnihtečnosti
– Laboratorijska ispitivanja telesnih sekreta i ekskreta
– Brzi One - step testovi
– Citološka, histolška i histopatološka ispitivanja
– Ultrazvučna dijagnostika
– Endoskopija
– Rendgenološka i druga ispitivanja
Zašto raditi laboratorijske analize?
• Da se potvrde vaše kliničke sumnje
• Kod postojanja manje karakterističnih simptoma
• Praćenje toka bolesti
• Proveriti da li je bolest multisistemska (stare životinje)
• Provera pre opšte anestezije
• Praćenje efekta terapije
Klinička laboratorija
Faze u izvoñenju laboratorijskih analiza:
• Pre-analitička: – Zahtev za željenim analizama– Priprema pacijenata– Identifikacija pacijenata– Uzimanje uzoraka i njihova priprema– Transport uzoraka
• Analitička i
• Post-analitička
Veterinar:
“Ne verujem ovim rezultatima, mora da je u pitanju
neka laboratorijska greška”
Laboratorijske greške
Pre-analitičke (46 – 68,2%) - trenutno
osnovni izvor nepouzdanosti rezultata
Analitičke (7 – 13,3%)Post-analitičke (18,5 – 47%)
Najčešće pre-analitičke greške:
• Pogrešno vreme uzorkovanja krvi ili urina
• Netačna identifikacija i obeležavanje uzoraka
• Nepravilan redosled vañenja krvi tokom vañenja
u različite epruvete
• Neodgovarajući antikoagulans
• Nedovoljna količina uzorka
• Zgrušan uzorak
• Hemoliza, lipemija
• Formiranje hematoma tokom vañenja krvi
• Hemokoncentracija
Način uzimanja krvi
• Antikoagulansi
– EDTA 1 mg/ml krvi
– Natrijum oksalat 2 mg/ml krvi
– Natrijum citrat 5 mg/ml krvi
– Natrijum heparinat 0,75 mg/ml krvi
Izgled seruma
• Najčešći uzroci hemolize u serumu ili plazmi:– Nepravilno uzimanje
krvi
– Naglo mešanje krvi
– Predugo stajanje na sobnoj temperaturi
– Zamrzavanje
– Centrifugiranje na velikom broju obrtaja ili suviše dugo
Osnovne hematološke analize
• Broj eritrocita
• Broj leukocita
• Broj trombocita
• Koncentracija hemoglobina
• Hematokrit
• Eritrocitni indeksi (MCV, MCH, MCHC, RDW)
• Broj retikulocita
• Leukocitarna formula
• Koncentracija serumskog gvožña
• Koncentracija ukupnih proteina
• Sedimentacija eritrocita
• Morfologija krvnih elemenata
• Pregled kostne srži
Odreñivanje broja Eritrocita
•• brojanjem u specijalnim komoricama za brojanje brojanjem u specijalnim komoricama za brojanje eritrocitaeritrocita
•• automatskim brojaautomatskim brojaččima koji se moraju ima koji se moraju podepodeššavati za svaku avati za svaku žživotinjsku vrstuivotinjsku vrstu
Automatska metoda na bazi
provodljivosti ćelija
Kap krvi
TEHNIKA PRAVLJENJA KRVNOG RAZMAZA
Primeri loše napravljenih krvnih razmazaPrimer dobro napravljenog
krvnog razmaza
• napraviti KR u roku od 60 minuta od uzorkovanja
• sušenje najmanje 10 minuta na sobnoj temperaturi
• ukoliko je vazuduh vlažan: upotreba fena ili ventilatora (Allison i Meinkoth, 2007)
Način sušenja krvnih razmaza
• Krvni razmazi se boje Romanowskim tipom bojenja
1. May-Grünwald Giemsa (MGG)
2. Wright Giemsa
3. Hemacolor (Merck)
4. Diff-Quick (SiemensHealthcare Diagnostic)
Bojenje krvnih razmaza
Normalna morfologija eritocita(krvni razmaz bojenje po May-Grunwald Giemsa-i)
normohromni normociti
1. 6-7 mikrona
2. ružičasti sa izraženom bleñom centralnom zonom
3. okrugli
4. bez inkluzija
Eritrociti psa (uveličanje 100 x) Eritrociti mačke (uveličanje 100 x)
1. 5 –6 mikrona
2. ružičasti bez izražene bleñe centralne zone
3. okrugli i blago nazubljeni
4. bez inkluzija
Hematološki rezultati• WBC 19.1 x109/L 6.0-17.0
• Li 3.25 x109/L 1.0-4.80
• Mi 1.20 x109/L 0.5-1.35
• Gra 14.6 x109/L 3.0-12.0
• Li 17.0 % 12-30
• Mi 6.3 % 1-11
• Gra 76.7 % 62-87
• RBC 5.90 x1012/L 5.50-8.50
• HGB 168 g/L 120-150
• HCT 43.6 % 37.0-55.0
• MCV 74 fl 66-70
• MCH 28.5 pg 19.5-24.5
• MCHC 386 g/L 310-340
• RDW 16.6 % 15-20
• PLT 291 x109/L 200-500
• MPV 9.5 fl 8.0-10.0
• PDW 38.8 % 30-45
Retikulociti
Broj retikulocita se odre|uje na krvnom razmazu, u odnosu
na 1000 izbrojanih eritrocita, a za bojenje se koriste komercijalne
boje ili metilensko plavo.
Krvni paraziti
• Hartworm - srčani
crv
Leukociti
• Leukociti se dele na osnovu oblika jedra, sastavacitoplazme (prisustvo granula sa enzimima i antibaktreijskim supstancama) i sposobnosti da primajuboje na:
• Polimorfonuklearne }elije ili granulocite u koje ubrajamo:• Neutrofili - Ne• Bazofile - Ba• Eozinofile - Eo• Mononuklearne }elije ili agranulociti u koje ubrajamo:• Limfocite - Li • Monocite - Mo
Neutrofili
• Normalni neutrofili
kod pasa
• Mladi
nesegmentiran
neutrofil (označen
strelicom)
Bazofilni granulociti
• Bazofilni granulociti
pasa
• Bazofilni granulociti
mačaka
Eozinofilni granulociti
• Eozinofili pasa
• Eozinofili mačaka
Monociti
Limfociti
• Reaktivni limfocit stimulisan antigenom
• Atipičan limfocit kod limfocitne leukemije pasa
Trombociti
• Trombociti psa na
sredini slike strelicom
označem mlad
trombocit
• Trombociti i eritrociti
kod mačaka
BIOHEMIJSKI PARAMETRI KRVI U DIJAGNOSTICI UNUTRAŠNJIH
BOLESTI PASA I MAČAKA
Hematološki i biohemijski pregled krvi je najjednostavniji, najbrži i najjeftiniji pokušaj otkrivanja skrivenih unutrašnjih poremećaja koji se ne mogu videti golim okom
• Serumski proteini
- Ukupni proteini
- Albumini
- Globulini
• Oboljenje bubrega- Urea
- Kreatinin
- Fosfor
• Oboljenja jetre- ALT, AST, AP, GGT,
Bilirubin, Amonijak .....
• Oboljenja pankreasa
- Amilaza
- Lipaza
• Elektroliti
- Na, K, P, Ca, Mg, Cl.
• Mi{i}ni enzimi
- CK-3, AST
• Metabolizam ugljenihhidrata
- Glukoza, Fruktozamin
• Metabolizam masti
- Holesterol
• Mikro i makro elementi
- Fe, Pb, Zn, Cu
Brzi dijagnostički testovi u dijagnostici pojedinih oboljenja pasa
i mačaka
BRZI DIJAGNOSTIČKI TESTOVI
• Jednostavna primena• Očitavanje rezultata brzo i lako• Čuvaju se na sobnoj temperaturi• Vrsta uzorka: puna krv, plazma, serum, feces,
iscedak iz nosa i oka
rezultati nakon 10 minutarezultati nakon 10 minuta
FIV pozitivnoFeLV pozitivno FIV/FeLV pozitivnoKontrola (Negativno)
Način izvoñenja brzog dijagnostičkog testa za FIV i FeLV